[求助]小鼠胚胎干细胞体外定向诱导技术求助

yedanna

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; Q" s5 a9 L6 q( H( D你的拟胚体形态看起来还不错的。转到板里培养的时候，前面2天最好没碰，否则影响贴壁。我用的4孔板培养，每个孔放3-4个拟胚体。拟胚体的数量会影响其贴壁。培养基的PH问题不大，我们实验室很少测PH的，粉剂溶解后过滤，直接用了。

yedanna

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3 M0 ^0 J7 z: [4 V! S+ h$ t
2 B1 d& k- s* o! @6 Y0 A3 o前面两天，不要动培养皿，也不要换液。2-3个EB/孔，也不多，合适了。
/ G# {8 y$ C% x0 f2 C! U你能具体说一下你的培养方法吗，看看原因到底出在哪里

yedanna

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- `, w* ?7 \! R- A
$ K5 d9 Q9 {+ s6 ^/ F/ ^6 e你们用的是无滋养层培养胚胎干细胞吧。悬浮两天用什么培养皿，是用细菌级的培养皿吗？悬浮培养才2天就转入24孔贴壁培养了？是不是时间太短了，所以贴壁效果不好，然后影响分化呢？

yedanna

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$ K' J8 T: o/ X$ s: \7 b  q
我们用的都是进口的细菌级培养皿。我一般悬浮7天

yedanna

回复 summer0914 的帖子0 P8 _+ H' R. w4 W8 G  m

- U1 q  \$ Y$ o- c) H) r7 |一般是贴壁培养再使用VC刺激，8-12天一般指的是贴壁培养后的天数，不算悬浮培养的天数