请教一个细胞培养的问题

朱雀高

我的细胞24小时贴壁之后，需要用脂多糖进行刺激，有两种办法，一是将脂多糖与培养基混合均匀之后，直接将原培养基换掉，优点是这样脂多糖比较均匀，缺点是脂多糖容易吸附。二是先换成新的培养基，然后再加入脂多糖，优点是可以避免脂多糖在容器中配置时的吸附作用，缺点是不容易混匀，请高手指点，该怎么做，多谢了！！！！

ljs

这个方法以前没有见过，个人认为两者都可以，我建议的方法是第二种。更换新鲜的培养基，加入脂多糖，加入后用移液管均匀吹打，轻轻吹匀，避免将贴壁细胞吹下来。也可以加入脂多糖后上下、左右震荡培养瓶来混匀。

Donnies

个人认为还是第二种好一些。

452359357

可以先换成新培养基 但是少加一点 再把脂多糖与培养基混合均匀之后加入 吹打混匀  也就是把新的培养基分成两份 先加一分没有脂多糖的 再加混匀了脂多糖的一份进去就好

meister

回复 朱雀高 的帖子) p6 @& @# P" \0 q
2 l( B0 H/ |* z
没做过， 不过如果脂多糖不易混匀的话，最好预先混合。
4 w) V& V; l, U7 z% ^- y2 s可以在PCR管中预先稀释一下， 然后加入培养基中。

xbs530515

你的脂多糖应该是粉末吧？你选择第二种方法，还不是有个配制稀释的过程，玻璃瓶对脂多糖是否会有吸附？个人认为，你在配制过程中，即便会有吸附，也应该不大。你选择第二种还有个问题是，你加样量肯定很小，而且不易混匀。综合以上两点，个人倾向第一种方法操作。

zhanglei1414

预先混匀比较好

labghost

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好办法，我赞成。