液氮为何会进入冻存管，是否会污染细胞

labghost

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我的操作过程是，加入细胞悬液-保护液后，用封口胶封口，然后放入4度冰箱平衡，然后直接投入液氮中，从来没出现过这个情况诶。说实在的，这些东西，我还是支持进口，移液枪和枪头上我就吃了不少国产亏。

username

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- A2 k) Z3 P9 i: \, Q# B  d% W! Z7 c6 L9 b1 r' ?3 e
请查阅美国热电公司的产品信息介绍

zhanglei1414

还是别用劣质的冻存管了

hygene

可能已经被污染了，如果做一般研究，建议楼主可以复苏看一下，如果是特殊研究，建议淘汰。

nichifanlema2

回复 xbs530515 的帖子  I; R8 k, {6 |. a0 H& G
% D# u% o. [1 t1 c
我用的是nunc的冻存管，我看了一下，几乎所有的管都进液氮了，我以为是我没有拧紧的原因，结果后来我都拧紧了，还是进液氮。郁闷的是有一个孔污染了！不知道大侠有什么高招啊~~

huqiao1649

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8 j- ]* G8 c/ j一般都在-186~-195，脐血就是这样放的2 U' d$ r# b6 Q* Q% y4 U5 w0 X; P; y

crazytime

绝大部分的冻存管在低温下，密封都是很脆弱的，一般都会造成液氮进入，从而有可能造成支原体的交叉污染，可以考虑将冻存管存放在气象里，或者有一种管子，可以将冻存管密封住，但是会对传热造成影响

xbs530515

这的确是个问题，我们也遇到很多次了，而且就是corning的炸的多，现在取细胞都有些过于谨慎了。必须带上防护眼镜，如果是MM最好是带上面罩，严格保护自己。可以考虑换其他品牌的进口冻存管，我现在使用的是nunc的，相对要好得多，但是还是炸过一次。至于进液氮的原因，我个人认为这个可能是冻存管本身的问题，也有可能是在冻存细胞的时候拧的不是很紧。

ying

求相关文献的支持（有文献论证说漏进液氮会污染吗）

cnlindan01

个人感觉 是因为投入液氮的时候急速降温导致冻存管内压力过低导致的。有液氮进入，必然存在污染的风险，而且的确会遇到解冻时冻存管爆炸的情况（我遇到过）。
1 H7 B3 {* ~& f可以将冻存管装的比较满（90%），并加强密封，应该可以解决。
2 e; u. |. w2 p( |2 U* E想法将麦管灭菌（如果有无菌的更好），可以改用麦管装样，然后两端封口。用麦管配套的支架放到液氮里。1 }6 w% L/ _, c9 M
短的毛细管或麦管装样，封口后放到冻存管里，这样的话冻存管别太密封，可以钻个小孔什么的 方便液氮进出。每次从冻存管里取一小支就可以。