液氮为何会进入冻存管，是否会污染细胞

ying

最近发现，我的一些MEF所在的冻存管，从液氮中拿出后管中是有液氮的，可以看见液氮在沸腾。
5 B) `; `: R" J* r前段时间有人在液氮罐里面爆炸了好多管子，其中里面还有病人样品。( T% z- J& p& `" U; K
两个问题，1，液氮为何会进入管子？保证是不漏水的。复苏时候为证。进口corning的。2，会带入污染物到细胞里吗？

username

冻存管即使封闭很严，在管内外巨大的温度差异下，由于管壁变型等原因，液氮仍会进入管内。液氮进入管内，有可能带入污染物，因此有些单位使用气相冻存罐保存临床标本和冻存的脐血等。

ljs

1.常温的冻存管进入液氮后，冻存管内部会热胀冷缩，在冷缩的过程中，液氮进入冻存管。拿出来后，进入的液氮遇热膨胀，导致冻存管崩裂。7 P% J$ a3 ?" }1 B1 e
2.理论上，液氮进入冻存管，不会有污染物的，因为液氮的内部不会有污染物可以存活。
8 b; [9 O: |  Q: c% `- E3.楼上的可以参考。个人建议，仅供参考

Donnies

每次冻存完的细胞是直接从负80度放到液氮里，这个过程是没有问题的，有时候是你在从液氮罐拿细胞的时候，由于热涨冷缩冻存管出现了爆炸，如果冻存管裂了，细胞就不能再要了，如果液氮进入了冻存管内，你可以复苏之后看看细胞是否出现了污染，一般来说，从液氮中取细胞的时候要注意自我保护，另一方面也需要快速的冻融提高细胞的活力。

meister

回复 ying 的帖子
1 N& Y6 x) S; Y: L* Y) X$ M, T$ }  [! X) i
首先污染是肯定的。
7 ]6 r$ p7 ~- E& G5 V其次之所以会进入是因为冻存管质量问题，或者管口封闭不严。& c% D+ f; w1 g& V6 ]$ z
水货冻存管肯定会出现问题。 本人从事细胞培养近20年， 从没有液氮进入，导致污染，爆裂情况。
4 b4 X! w: I# A& J7 k所以远离劣质产品即可。

452359357

建议用气态液氮罐冻存  就是让冻存管不直接接触液氮 而是接触液氮上面的气相 当然 温度相对要高一点 但影响不大 不会造成交叉污染和爆管的哦

meister

回复 username 的帖子
% q; q6 T, M7 u# G
6 K- L1 ]3 L/ \) Z& e气相液氮罐的温度不知道是多少， 可以保证细胞处于静息状态吗？

biomater

复苏时从液氮取出后，可以放在-80冰箱2-3min，待液氮挥发后，在进行复苏。避免爆炸

雁南飞

冻存管不是“密封”产品，没有完全封死，而是“密闭”，存在一定的间隙，所以在液氮这种极端温度下，材料的性能可能会发生我们想象不到的变化，从而发生渗漏，进而可能造成衣原体或其他如细菌之类的污染。- n8 u$ o+ ^' B/ q& v
解决办法一是采用“密封”产品，比如装完之后熔封，二是存放在液氮气相。

cnlindan01

个人感觉 是因为投入液氮的时候急速降温导致冻存管内压力过低导致的。有液氮进入，必然存在污染的风险，而且的确会遇到解冻时冻存管爆炸的情况（我遇到过）。$ X* y# m+ \7 E4 H- n' N
可以将冻存管装的比较满（90%），并加强密封，应该可以解决。1 I& M* k, j0 a' Y  j
想法将麦管灭菌（如果有无菌的更好），可以改用麦管装样，然后两端封口。用麦管配套的支架放到液氮里。
5 u* W0 i. I) o8 r- w  F% ]& c! X短的毛细管或麦管装样，封口后放到冻存管里，这样的话冻存管别太密封，可以钻个小孔什么的 方便液氮进出。每次从冻存管里取一小支就可以。