请教克隆的挑取

your1024

请教一下，大家在挑克隆的时候用的是什么来观察要挑取哪些克隆的呢？普通的体式镜么？为什么我用桂光的那种老式体式镜根本就看不到皿里的细胞呢？它那个底部光源是透视过去的，根本就看不清细胞轮廓。大家有什么好的挑克隆的器材和方法能介绍一下么？谢谢！

echowdk

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1 m$ L. k5 q+ q) S3 x+ d) r% B, C0 ^' |2 O2 s
如果克隆长得很大的话，肉眼就可以看见的。我一般就在普通的倒置显微镜下挑克隆，当然也可以用体式显微镜，但是我觉得体式的立体效果不好。我把我挑克隆的方法步骤列在下面了，主要是针对干细胞克隆的挑取的，你比较一下：
' f3 e. g( E; A5 h6 l: }1. 去掉培养皿中的培养液，加入适量的PBS。; z5 K/ ?( i7 Y& f8 V
2. 准备好胰酶（预热）。打开千级风（因为要在超净台外操作，预防细胞污染）。如果实验室没有此设备，加快实验速度。
& g) G# U+ k8 g3 [$ \3. 用200ul的piepet最好，吸力也最大。在视野范围内找好克隆，用枪头把克隆周围的杂细胞划开，枪头对准克隆，一吸就吸上来了，然后放到胰酶里消化or not（依细胞而定）。

vividvivid1225

学习了

your1024

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! V1 y0 D0 a/ P" L' p- d' h- ^6 S" p9 k/ E3 Q" K
多谢多谢！我以前也是一直这么干，不过我们那个实验室没有那么高的规格，自从被污染了一次之后就再也不敢那么干了。所以才想怎么才能在安全柜里操作。想专门买个镜子老板不愿意，唉

your1024

回复 vividvivid1225 的帖子- q; u' T" V: b! Y
$ [4 {* Y+ \9 D0 e" o/ a
共同进步！

echowdk

回复 your1024 的帖子5 I% ^$ Z" E6 W) S( `

$ p9 N- d  y6 X- X- P, p恩。操作快一点，应该没啥问题。Wish you luck.