问个抽质粒的问题，Cartidge可以用布氏漏斗+滤纸代替吗？

weiyepan

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) f2 f: [7 L  {* Q' N
; e9 I. f% {$ o# Q+ x离完心再过滤，效率会高很多。5 M- r+ I+ F# C$ l+ T3 F* g
另外，推荐一个牌子， MN的便宜又快速，在clontech有代理。

weiyepan

我好像没见过QIAGEN离子交换类型抽质粒的buffer里面有FWB2的啊？
/ {2 ^) ^" N, e7 V1 D你能把protocol贴上来？

weiyepan

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我好像没见过QIAGEN离子交换类型抽质粒的buffer里面有FWB2的啊？) w1 F% Y! A2 k( |% {
你能把protocol贴上来？

weiyepan

回复 rexhz 的帖子0 P2 Y  `1 G) j

6 l3 t+ M0 e7 `* P9 H( k1 g, M" G对，这个很好用，便宜。好像能有个25%~50%的折扣，自己磨下嘴皮子。

weiyepan

顺带提醒一下，中提是500ug的，碉堡了！重新用个两三次应该没有问题，不过它是silica menbrane的matrix，QIAGEN的是树脂，按重复使用来说应该是树脂的次数会多一点。但是如果按流速来讲是膜类型的要快很多。

weiyepan

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* H# e# n( B. k  ], z1 m9 C+ k
* f/ c9 ?& N4 N; R我看了那个protocol，那个FWB2就是把你剩在膜上部的DNA洗出来，增加回收率。你不用当然能提出DNA来，但是产量会低一点。另外你用普通的膜去过滤，也会有一部分残留在膜上。如果你的布氏漏斗是硅质的，那也会有一部分DNA结合到漏斗上，下次提DNA的时候有可能会污染。
0 f  H5 T* ^( U1 P* s7 iMN的在国内也是clontech代理，具体我不是太清楚。10楼好像已经找到了，你可以问问他。

weiyepan

回复 zhangtcm 的帖子
$ f: N1 {0 x. k/ U$ M4 B5 q
( J' g5 b- @8 G/ `国产的大抽不是说原理上做得比国外差，现在抽质粒的方法都很成熟了。但是，国内的原料质量不稳定是肯定的，至于质控有没有做好，那是看一个个公司的良心了。
+ N: F% m3 z. b, G: `6 p& I另外，QIAGEN和MN的大抽都有用的离子交换。现在离子交换方法的kit不多，成本高，国内销量不好所以没人做。国内用的都是硅羟基方法的，这种方法很难去除内毒素。至于说转染有没有问题，一个是看最终抽出来的浓度，另一个是看细胞好不好转。如果说都转的293T，那我看PEG沉淀也能做。