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图片中是典型的脐带间充质形态吗?   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-11-22 09:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 UC-MSC 于 2012-11-22 09:08 编辑 $ |! R- x5 d, M' T/ }5 t: P) P' x

" `" ^: o( k  V2 P: Y# ]/ J细胞表达CD73 C90 但不表达105,很奇怪。能分享一下经验吗?
3 B) N9 ~; Q4 t3 \0 q
/ N! G2 R: r8 z7 I9 c7 rwharton's jelley用胶原酶消化10h,添加少量透明质酸酶降低粘度(还有小部分组织未消化完)' M( f0 c/ ^! S% x
培养基为LG-DMEM+10%FBS+2ml Gln+5ng bFGF
9 s1 g8 b7 H& }  c- R' ?( }+ k: L图片中细胞为第4代 第二天。
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沙发
发表于 2012-11-22 09:44 |只看该作者
我期脐带来源也是这个形态,问一下透明质酸酶很有效吗?不会对细胞造成影响吗?我每次过滤都很费劲,如果没有那么粘就太好了。
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藤椅
发表于 2012-11-22 10:24 |只看该作者
形态基本也是这样,有点乱,5ng bFGF是不是多了点哦?另外,流式再做一遍呢?
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板凳
发表于 2012-11-22 10:34 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
我做的基本上也是这样的,105表达也很低9 f' `# a& p5 }. E4 C4 {, U! u
我一般不用透明质酸酶,使用两次离心法分离,效果好些,
4 N3 r# v* a9 e  L4 h' J( X6 n第一次500r/min,取上清,第二次2500r/min,取沉淀
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报纸
发表于 2012-11-22 10:57 |只看该作者
回复 UC-MSC 的帖子
7 L9 z" _2 s5 z+ w% a$ V' C, W  {( l* j" j. Z3 ~$ @4 ?
谷氨酰胺的单位ml吗,2ml有多少mmol,用的是什么培养瓶?这个培养基的配方写得不太清楚。
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2012-11-22 11:18 |只看该作者
有点像吧。不是很好。你那图上的细胞有叠加的。
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发表于 2012-11-22 12:38 |只看该作者
是MSCs,我的脐带的CD105的表达还可以的。。。
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发表于 2012-11-22 13:37 |只看该作者
回复 caiyu07248 的帖子
0 }5 |/ i! V7 B) F3 Y! F4 ]1 O3 o0 k
5 N: W% o: f$ O+ D- L9 R( s1 P我只加了几百微克(300-800都可以吧),效果较明显,液体没那么粘了
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发表于 2012-11-22 13:41 |只看该作者
回复 deshenglll 的帖子
* a( E- k3 Y$ R6 G7 b* Q5 p7 R( Z' `) e' [* R. L- C; E
能提供一张好图吗?

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发表于 2012-11-22 13:51 |只看该作者
回复 sj842563 的帖子
+ G2 ~- R5 {* J3 f* |( x0 K0 B
) ?7 s0 f( N/ b8 K$ b这样的话,杂细胞应该比较多吧,而且有可能会有一些微小的组织块,还有一些纤维状的东西,我也这样做过,感觉里面杂东西比较多,有点“脏”。
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