细胞复苏为什么遵循慢冻快融原则？

happy_noel

细胞复苏为什么遵循慢冻快融原则？如果慢冻不会出现冰晶，那慢融为什么会出现冰晶？最近细胞复苏活率很低，始终不知道是什么原因，冻存和复苏都使用同样的手法，有的细胞批次就正常，有的就会死亡很多。大家冻存都用液氮架吧，拿一个冻存细胞需要把整个架子提出来，其它细胞经过反复冻融是不是也是影响活率的原因？怎样避免其它不相关批次细胞反复冻融？大家可以一起探讨，谢谢！

s1l22008

回复 jensn 的帖子& P0 x" z5 M% t' Z; R& S
0 F5 d( ~# w: ^/ d, V3 _
自由能下降不就是混乱度增加吗?怎么你说的两种过程都是混乱度增加呢？不懂不懂。

weibin2002

呵呵 学习了。& z# S6 N% [2 H% h: L! A' _  y/ B2 b' O
我也抛个砖引个玉啊，慢冻是为了冷却均匀，防止局部冰碴产生破坏细胞，同时逐步使细胞代谢逐步减缓；快化也是为了不产生局部冰晶吧，可能。

lql2006wh

回复 lql2006wh 的帖子: ]: p$ Y# V( t' Y& R* Z+ U

& M9 |9 e6 G9 L5 _3 g6 n- ~不知道咋弄的变了，纠正一下：
4 L* S( D5 j0 q复苏时留意比较一下“加培养基培养→细胞贴壁后立即换液”与“融化后稀释离心→重悬细胞接种”哪个效果更好，这个看离心机吧，我们原来用飞鸽的，“加培养基培养→细胞贴壁后立即换液”好，后来实验室新添了个Sigma还是Gibco离心机，就是“融化后稀释离心→重悬细胞接种”要好些了。

cartoonyang

我们一般用20%FCS+5-7.5%DMSO冻存。-80度过夜，第二天转移置于-140度或者LN2中长期保存。

jensn

回复 mkhorse 的帖子- T* C1 m2 [6 m7 o, M# [0 d4 Q

, C) U- \  f9 m7 }谢谢，自是个人的一点想法，不一定准确。共勉!

mkhorse

回复 jensn 的帖子
" ?: x# I: w# Y
& m2 O' o0 I! Z# ?* h这解释牛啊，感觉很有哲理

ruth891005@yaho

受益匪浅啊

wen373

客气客气。。。

happy_noel

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5 K! n4 }1 I) c) E1 {3 Y( d2 m+ j" Z& {; T9 R4 u  Y  q, k
回答好详细，谢谢