逆转录病毒包装

huangcong1988

前面做逆转录包装，看到文献中报道，以及别人的经验是目的基因：Gag/pol：VSVG的比例为10:9:1，还有一种比例是8:4:1，我不确定哪种更好，因为有人说VSVG对于293T细胞毒性很大，所以，大都倾向于用前一种，但是，我摸条件发现，三种质粒共转293T的时候，比例为8:4:1的时候荧光最强，那是否这个比例是最好的呢？

1197494666

plat-E细胞在哪里买？:)

干细胞技术人

很好

Jonathan

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9 k+ m* |! O- H! `( a: S( e  y
) f/ m6 S9 R; ?/ G# s' U我们在GIBH的时候都是用293T。plate-E是用来包装鼠ips病毒的。当然也可以用来包装人的，只是效率低。据说是这个原因。你还可以用293FT，其实都差不多。呵呵。你可以去GIBH那边要一管

zhangtcm

回复 huangcong1988 的帖子/ _) o" B* [; q" G' u: K
, D" i9 p% k6 I" d
哈哈，plat-e哪儿有便宜买的，有消息了通知一下

zhangtcm

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9 E9 L) C$ e4 Z5 B: i4 h4 ?7 o$ v
Generation of Human induced Pluripotent Stem Cells" P5 K8 t: u( |5 ?+ j, _2 j
Center for iPS Cell Research and Application (CiRA)
2 ]) c4 X* c8 q7 N% tInstitute for Integrated Cell-Material Sciences (iCeMS)4 r3 M# m. v/ q6 ?
Kyoto University
% |) q& J% T+ K" R这篇文献是用plate-E来包装人ips用的病毒的，这篇文献也蛮经典的

Jonathan

回复 akxiaoqiang 的帖子  L3 K1 ?, \4 a* H+ p0 g

" u5 P# B7 O7 F( h+ C' Vplate-E一般用于包装鼠ips用的病毒，人一般都要用293T，然后要多加入一个包装质粒

huangcong1988

回复 akxiaoqiang 的帖子3 _( s4 {( y  P# n" I
; J* F. f: |1 s4 g; }
想问一下，您这个plat-e是哪里买的

akxiaoqiang

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2 M- d7 b- h) B3 [! R
& F' d  }. G1 K9 X是的，用这个细胞就不需要包装质粒，直接转。一些科研院校都会有的，问问呗

huangcong1988

回复 akxiaoqiang 的帖子/ ~6 Y: C3 e% P+ Q* [
! W+ r5 i* F$ f& T5 w6 Q, t
我之前一直在找这个细胞，找了好多地方，有的是没有，有的太贵了