如何把小块组织消化成单细胞？

759512199

如何把剪碎的组织消化成单细胞，而且对细胞的损伤最小，用胰酶好还是胶原酶好？要多大浓度啊，跪求高手指点。

wnavy200299

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! Y* y$ r; [; O! W  f pVSMC的分离培养及鉴定.pdf (421.63 KB)

2012-12-11 22:58 上传

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1 G4 l9 }+ P/ ^* o7 |5 ]9 `7 F9 V' g要想损伤度最小，那就干脆不用什么酶，直接用组织贴块法。可以参考一下附件。个人意见，仅供参考~

759512199

回复 wnavy200299 的帖子8 V% e- W  i2 H  M1 x* B

0 J  _, y( D$ N! n我需要直接从组织游离的细胞

ZHUTZ

我从肿瘤组织原代提取，冲洗，剪刀剪碎成1mm大小，0.25%胰酶消化20分钟，吹打后全培养基培养，次日即可贴壁

zttamy

回复 759512199 的帖子7 [3 |$ b, s8 |
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胰酶对细胞的损伤还是很大的，而且浓度和时间都不好掌握，还是胶原酶好些

小渝

不知道你消化的是什么组织，现在有胰酶替代物的（Gibco），相对比较温和，单纯的机械吹打可能也会因为吹打力度的控制不好对细胞造成不同程度的损伤。

小渝

不知道你消化的是什么组织，现在有胰酶替代物的（Gibco），相对比较温和，单纯的机械吹打可能也会因为吹打力度的控制不好对细胞造成不同程度的损伤。

wujh1986

胶原酶更好些，当然也贵啊，0.1就行吧，可以自己衡量一下

huangcong1988

哪种组织？你先要说明是哪种来源的组织才行，不然的话，酶的选择就无从说起了，比如胶原酶适合于消化一些结缔组织，比较温和，胰酶的话一般用于细胞传代的时候消化。组织块分离细胞种类很多，有贴壁法，消化法，也有天花板培养法，主要也要考虑你的细胞类型。酶浓度和消化时间得你自己摸条件了

conan110

以前做的时候，直接用酶消化的结果很不好，成功率较低