分离胚胎神经干细胞时候，D-hanks的作用？

碧落

大家是怎样分离胎鼠神经干细胞的呢？
4 t+ [. H' e" g- g/ ~比如取E12.5的大脑皮层干细胞，那时候大脑还未发育完整，两个大脑半球还很脆弱，经常在撕脑膜的时候，把皮层都撕碎了。通常我们是将大脑浸泡在HBSS中的。+ `( u5 h- I! g. Y- ]. ^" ?
但是某次见别的实验室的一个师兄分离E18.5的海马神经元的时候，用的是D-hanks，依稀记得当时他的解释是，D-hanks可以让组织变硬，易于分离。具体机制已经忘记了，再此和大家讨论一下。
# w6 g7 W& |4 v( A* s+ {, ~% uHBSS和D-hanks的区别？D-hanks真的好用么？' n+ e# Q7 s" U, J
希望互相学习，分享经验，欢迎参与讨论哦！

lousia04306

HBSS的全称是Hank's balanced salt solution ，他和D-hank's液都是平衡缓冲液，只是所含组分稍有不同。D-Hanks成分：（g/L）
4 t; H0 t2 k& F' ` KCl:0.47 G' H  g' }- F& U7 [  }5 R" ^
KH2PO4:0.06$ x+ _9 ]+ j# j1 x9 m+ k5 V& M( j( E6 f
NaCl:8.0
% k6 e2 \5 Q. v# c NaHCO3:0.35
2 L: U+ h+ m: ]) q& W9 m Na2HPO4.7H2O:0.06(Na2HPO4不含水：0.053)/ G9 j; p1 p0 n4 }. d4 J
酚红：0.02
& K; O! Z9 D% t# \& O
1 T9 a8 p/ U& e: p. \0 Q% lHanks液的配制：（1L） NaCl 8克、KCl 0.4克、MgSO47H2O 0.1克、MgCl•6H2O 0.1克、CaCl2(无水)0.14克溶、 葡萄糖1.0毫克、NaHPO4 0.154克、KH2PO4 0.06克、0.4%酚红液 5毫升
$ z' ^% X7 K* Q1 ` 有的不加酚红。
0 O5 s$ |) _  J  _胰蛋白酶在pH8。0，37度时消化能力最强。溶液中的Ca、Mg离子和血清会降低其活力,一般配制胰蛋白酶溶液时。需用无Ca、Mg离子的D-Hanks液。所以说和是否易于分离没有多大关系。& {) m  O& {6 ?