分离胚胎神经干细胞时候，D-hanks的作用？

碧落

大家是怎样分离胎鼠神经干细胞的呢？
- q3 G* |& r$ z9 p# `# F1 J" n比如取E12.5的大脑皮层干细胞，那时候大脑还未发育完整，两个大脑半球还很脆弱，经常在撕脑膜的时候，把皮层都撕碎了。通常我们是将大脑浸泡在HBSS中的。0 N; D6 u" }" Y
但是某次见别的实验室的一个师兄分离E18.5的海马神经元的时候，用的是D-hanks，依稀记得当时他的解释是，D-hanks可以让组织变硬，易于分离。具体机制已经忘记了，再此和大家讨论一下。$ P% ^: X. x- r: U6 u! ^0 D% y3 q
HBSS和D-hanks的区别？D-hanks真的好用么？6 H# ~% i! C6 o4 X: F
希望互相学习，分享经验，欢迎参与讨论哦！

lousia04306

HBSS的全称是Hank's balanced salt solution ，他和D-hank's液都是平衡缓冲液，只是所含组分稍有不同。D-Hanks成分：（g/L）
$ p9 Q. H. A& x/ ?6 i KCl:0.4
* U3 v  n6 ^$ b KH2PO4:0.06! n  W1 L6 s2 b& f/ [$ a( @! h
NaCl:8.0
/ g$ b4 A% x( ?) H8 P NaHCO3:0.35
+ J$ j2 Z( {2 c1 U Na2HPO4.7H2O:0.06(Na2HPO4不含水：0.053)
9 E& E* s: ]) R* i6 X# R 酚红：0.022 H. x9 P0 N8 I+ K7 u0 V3 X1 X* B

: g5 A, C& I# C. z# G  D5 \/ e- _. \Hanks液的配制：（1L） NaCl 8克、KCl 0.4克、MgSO47H2O 0.1克、MgCl•6H2O 0.1克、CaCl2(无水)0.14克溶、 葡萄糖1.0毫克、NaHPO4 0.154克、KH2PO4 0.06克、0.4%酚红液 5毫升8 B/ _" S* J, L/ e& c2 B
有的不加酚红。9 h1 X$ {, H2 c4 T
胰蛋白酶在pH8。0，37度时消化能力最强。溶液中的Ca、Mg离子和血清会降低其活力,一般配制胰蛋白酶溶液时。需用无Ca、Mg离子的D-Hanks液。所以说和是否易于分离没有多大关系。
* B2 i$ N# i, `7 T