用1.073的percoll分离兔子骨髓MSC，求助配置1.073g/ml的GE公司percoll的具体方法？

ytumuyangren

因全骨髓培养获取兔子骨髓MSC存在一定的弊端，因此在实验过程中想采用密度梯度离心的方式来分离MSC，看到有关兔子MSC分离所采用的percoll的密度梯度是1.073g/ml，查阅了一些配制1.073g/mlde percoll的资料，有不同的解释。3 g8 O5 V! T# @% i
方法一：
8 N. _7 D4 J2 |. f1.先用9份Percoll与1份8.5％ NaCl或1.5M PBS混合达到生理性渗透压；, I- i" ]- L, l- Q$ ?$ c" c
2.然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度：56体积percoll：44体积NaCL或PBS。
2 B/ b2 Q( ], n7 Q方法二：
& |0 G2 e1 l, R) S( A* l9ml percoll原液+1ml8.5%的NaCl=工作液 " _( L( g- _& r! x0 Q% M% g
10ml工作液+7.9ml 生理盐水=1.073的percoll : m) y" a5 D8 s5 u. M, p! k* a
特此请教各位大侠，帮忙解决一下，不胜感激。

ytumuyangren

回复 pengxuleo 的帖子
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嗯，谢谢pengxuleo的指点，今天试了一把，看到了传说中的雨雾层，分离后洗了一遍离心接种到T25的培养瓶中，明天看看效果，呵呵，希望能够成功。另外，我今天下了一份GE公司的percoll配制说明，讲解的还比较详细，里面有具体的公式。改天传上来给大家分享一下。

ytumuyangren

回复 644414915 的帖子4 X% D3 L+ h5 G# p9 s: R
9 q: v( C6 C* w6 q9 r
那你们养出来的细胞有没有鉴定？

ytumuyangren

最近一直忙的做实验，没有及时更新实验的最新进展，元旦前后又做了几次，都能分出单核细胞，但是分出的细胞长的太慢，呵呵，还没有达到消化传代的要求，再养养，等细胞传到p3以后再做做鉴定。