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大家血清是怎么解冻的   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-12-27 10:11 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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以前养细胞FBS都是慢慢解冻的,先放4度,融化了再用。因为有说法,快速融化会导致更多的蛋白沉淀。现在做间充质要求血清直接37度水浴。不知道哪种方法更合理,大家是怎么做的
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发表于 2013-1-5 12:15 |只看该作者
嗯,学习了,我是新手,以后就会多注意了。

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发表于 2013-1-5 10:51 |只看该作者
我们也是先4℃融化,灭活时才放入水浴中。只有着急用时才放入水浴中融化。絮状沉淀可以离心去掉。个人认为这样可以延长血清使用时间。
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发表于 2013-1-4 17:25 |只看该作者
回复 easternliu 的帖子
' x: F7 E9 o# O4 S1 s: u- D& o' O8 r7 ]: Y
一般室温先解冻,确定溶解在进行灭活,我们就这样做的,没有沉淀。
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发表于 2013-1-4 12:50 |只看该作者
wuzhoulingxiao 发表于 2012-12-31 10:45
* n; B5 t& s. a6 \; l我们以前做细胞培养,无论是肿瘤细胞还是MEF,都是将冷冻的血清室温融化,再进行55℃水浴灭活的。
8 U% V$ W6 i* r$ Y# A
灭活会产生蛋白沉淀么?最近用小牛血清,灭活后好多白色蛋白沉淀啊
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发表于 2013-1-4 12:44 |只看该作者
楼上说的对,室温和4℃都是可以解冻血清的。
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发表于 2013-1-3 19:44 |只看该作者
本帖最后由 弑之使徒 于 2013-1-3 19:45 编辑 8 L6 {9 e& g* m/ A, J6 C. _
* d  v) T9 c- C- {( i& g; H  @9 H
37摄氏度溶解,这样快速解冻会容易造成蛋白变性,用肉眼是看不出的,建议还是4度解冻吧~
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发表于 2013-1-3 12:47 |只看该作者
回复 guowang0224 的帖子
( ?9 V( [7 d" D* U0 I
% H; F0 a6 e. K在37摄氏度溶解时,一定要定时混匀血清,这样减少融化时间,保证血清质量。
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发表于 2012-12-31 11:07 |只看该作者
同样条件下,哪个方便选哪个。37度一直摇着,500ML 要融化,不累?
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发表于 2012-12-31 10:45 |只看该作者
我们以前做细胞培养,无论是肿瘤细胞还是MEF,都是将冷冻的血清室温融化,再进行55℃水浴灭活的。
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