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楼主: easternliu
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大家血清是怎么解冻的   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-12-27 10:11 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
以前养细胞FBS都是慢慢解冻的,先放4度,融化了再用。因为有说法,快速融化会导致更多的蛋白沉淀。现在做间充质要求血清直接37度水浴。不知道哪种方法更合理,大家是怎么做的
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沙发
发表于 2012-12-27 11:55 |显示全部帖子
回复 新疆八钢 的帖子
9 E' W2 n+ s8 \5 |$ n6 y% G
6 T8 J: G- \* f4 ]% Y5 Q5 e2 k. k" a恩,我现在也这样做的,那这样和放4度逐步解冻哪个更科学哦

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藤椅
发表于 2012-12-27 11:56 |显示全部帖子
回复 jihaijie 的帖子
+ ]2 j  h1 j2 c: z/ s  N7 w' Z# W0 }, @% u, F
目的是减少蛋白沉淀和保持血清品质,你怎么看?元芳

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板凳
发表于 2012-12-27 14:31 |显示全部帖子
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回复 元芳 的帖子
  Z' ~- X, J& m0 E4 ~. [( z: B  u' Z! Y1 v% P' B- |6 B5 [5 e9 Y" l
我也觉得,所以发现之前的破理论有问题

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报纸
发表于 2012-12-27 14:33 |显示全部帖子
回复 easternliu 的帖子
( u" q7 I$ W: E
/ ?" m) L7 b5 R; q# |; ~5 U回复完,发现你竟然是传说中的元芳!!!。。。,,,!!!~~~元芳果然一语惊人~~~佩服佩服

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地板
发表于 2012-12-27 14:33 |显示全部帖子
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9 {: p% u) v2 v/ u4 b) _5 t8 ?3 o0 ^+ a% x% L  h- ?
回复完,发现你竟然是传说中的元芳!!!。。。,,,!!!~~~元芳果然一语惊人~~~佩服佩服

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发表于 2012-12-27 15:00 |显示全部帖子
回复 guowang0224 的帖子
" W, [$ D; H* k1 Y+ V
* E4 M3 D+ P1 J( \- k* ^" X是很多人这样说,然后我取了一点血清,反复冻融很多遍,都没能见到黑胶虫的芳容,对于黑胶虫争议太多,目前我只能认为,黑胶虫是某种已知生物污染,操作过程产生的,而非冻融产生的蛋白结构污染,除非让我一睹黑胶虫的真面目,并好好研究一番
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发表于 2012-12-27 15:20 |显示全部帖子
回复 guowang0224 的帖子
- U; I6 W7 d$ Q1 u1 P$ [1 M( k- r7 F: T; B- I  p
那您比较过么,37度水浴和4度解冻,哪个产生较多的沉淀?

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发表于 2012-12-27 15:46 |显示全部帖子
回复 guowang0224 的帖子
. m! @# x/ |/ p8 E8 D  w0 }
3 t5 @0 L$ C$ [) Z( @# ^: d- A和我以前的观点一样,但是眼睛看见的现实和曾经的认知还是有差别的,所以有此疑问,感觉还是多观察试验一下,大家多交流交流
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发表于 2013-1-4 12:50 |显示全部帖子
wuzhoulingxiao 发表于 2012-12-31 10:45
) C2 D) p5 d, G; v) @  ]- k' [我们以前做细胞培养,无论是肿瘤细胞还是MEF,都是将冷冻的血清室温融化,再进行55℃水浴灭活的。

# [4 C, I- [5 c3 c0 @: M灭活会产生蛋白沉淀么?最近用小牛血清,灭活后好多白色蛋白沉淀啊
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