挑克隆

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如何将挑克隆操作效率最大化？

genedu

问的太笼统，什么克隆总得交代清楚吧

defu

你再说的详细一些吧

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胎盘msc组织提取接种，出克隆后挑取直接接种到另一孔板中。所以我想问问关于用枪头挑取后细胞无法分散和挑取过程中不能完全收集如何处理？

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! n; ?' [' k/ j% `8 Q  X胎盘msc组织提取接种，出克隆后挑取直接接种到另一孔板中。所以我想问问关于用枪头挑取后细胞无法分散和挑取过程中不能完全收集如何处理？

genedu

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. v: O! N' [! Y- A9 O1 ]7 v5 A! X# p
枪头挑取后，是要放到酶中消化一小段时间，然后用带有血清的培养基中和，而后用枪吹打20下左右，即可充分分散。在挑取克隆的时候，先用灭菌好的巴斯管或者针头，将克隆先划下来，再用枪头挑取，即可完全收集

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$ @8 g* ~7 X; Q# n
' E( L+ i& N; ~挑取的细胞消化后用带血清的培养基中和，然后就可以直接接种了吗？还有就是用枪头划细胞的时候划下来的细胞会随着培养基漂动，所以收集的时候就会少了

genedu

用两倍的一般是含血清10%-15%的培养基中和就可以直接接种了；划下来的克隆却是有飘的现象，但是训练的时间长了，这些很容易克服，如果训练时间比较少，您可以将板子里的培养基加得很少，只要能保证您挑取克隆时营养充分即可

lele

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2 K; C2 E% ~$ @4 E9 ^1 u, b
" W& t% K6 X; I% s) @# c同意，我也是这么做的，很不错的。