接种密度的问题

xuanxuan2121

每次消化完，接种密度都不能有效掌握，计数又觉得费事。请问你们各种T25\T75\10cm dish等培养器具你们的接种密度一般是多少呢，我指的是干细胞的接种密度。。

流泪的鱼

培养细胞就是个麻烦的事，不能怕麻烦，我们就是人工计数。现在也有了细胞计数仪，大约3-4万一台，不愿意费事可以买一台。但是所有的误差都在10-20%之间，所以你衡量一下。

yuhaoze

% S! b; r1 ~6 i9 x3 i6 z) R. e: p, Q% O% f) s, u$ i- a
什么干细胞？成体干还是胚胎干？
! G; f" w3 |$ c1 O1 }# e胚胎干你怎么计数呢?  只能来个大致的1传几吧
+ @+ k9 _" {& y0 m  {" U成体干还是最好计数吧，a simple blood cell counting chamber will do，花不了你几分钟时间。
6 l: V4 g- @) F0 ~4 I: S5 B我现在养293T每次传代的时候都计数呢，就是为了严格控制时间，也会知道细胞是长得快了还是长得慢了，状态怎么样，适合不适合做实验等等1 d& B8 i: i5 C) W
希望对你有帮助，同意楼上的观点。做实验不要怕麻烦，只要对实验有帮助，就去做。

weirenrong

看看

18605313076

最好计数吧，我们每次消化完都计数，不然肉眼误差太大。细胞接种密度不能太密，根据细胞的倍增时间计算，等再次消化处理时细胞密度可以达到80%左右较好。细胞处理时也需要密度达到70~80%左右，太密的话细胞活力会下降，重新接种后细胞容易老化和死亡。

jojo1988509

不知道你在说什么干细胞。这个没有统一的标准啊，自己的细胞看自己养的情况来，有的细胞长得相当快，你就传少点多传几皿，有的长得慢又不好，1比1的又再传代都可以啊，你看着细胞状态，千万不要整的太密或者长老了就行啊。

zm19900508

回复 yuhaoze 的帖子4 K% A, Y) s0 Q4 j# J* c
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293也要计数啊，真心嫌麻烦啊。我们都是隔天分，一比三或者一比四，基本固定不变，觉得挺好的

yuhaoze

回复 zm19900508 的帖子
3 N5 m, D7 M( Y- z" @8 E7 Q$ B, J6 P( X! e! Q

wf78365421

不用严格计数，按照一比三或者一比四，基本固定不变，细胞长的很好
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lizzy_81

不同的细胞接种密度都不一样啊。只能多查查文献，然后自己做些条件摸索。传代的话，一般1:4左右，最好细胞融合达90%传代