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[请教] 哪位大虾有关于囊胚双染的protocal,急用,谢了 [复制链接]

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包包
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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2013-1-10 00:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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哪位大虾有关于囊胚双染的protocal及注意事项,如果有您染好的图拜看一下就更好了,急用,谢了!

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沙发
发表于 2013-1-10 08:34 |只看该作者
在培养液中加入DAPI或Hoehst使终浓度为1ug/ml,37℃孵育10min,pbs洗3*5min,加PI使终浓度为50ug/ml,4°15min,再洗3*5min,就可以观察照相了,蓝而不红为死细胞!全程避光!!此外为了避免RNA的干扰还可以加点RNase100ug/ml
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2013-1-10 09:28 |只看该作者
回复 希望之光 的帖子
% i- Q; E: q, N( M( _2 [
. \6 [" a4 ^, V9 V( k, c' E. E; @多谢!您有没有染好的囊胚图,如果不介意的话,贴张图让大家学习学习

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板凳
发表于 2013-1-13 09:08 |只看该作者
回复 genedu 的帖子
8 E: C- d- L& T" R% l, u: [# z8 R3 b; S
呵呵 不好意思 我们实验室有人做 我不做囊胚 回头问他要一张哈

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优秀会员 金话筒

报纸
发表于 2013-1-14 13:17 |只看该作者
最好用抗体
6 k2 t9 l; d* M& n' Y和一般染色方法相似
; a3 Q  a, Z" y5 X上面的所谓双重染色,看似是节约成本,效果好,其实,这样染色在处理过程中很难控制。甚至是不能控制。! \, p% Z3 f" y9 a* n. F6 x! K9 h+ L
发文章上面的图片都是挑出来最好的。4 `- z  O& o* ~' b. i7 @. ^
很难有好的重复性。
9 e; e: `# B7 @0 T& _0 ^5 \% q你可以让一个人连着做3个囊胚,每次的结果差别都很大!) z9 I5 \& U( {, X
我做过这个7 h: t' d7 q* H$ q% |" D$ G2 a
抱质疑态度3 E6 i2 m& K3 N! A- B9 R  }
也可能我水平相对低一些
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