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[请教] 哪位大虾有关于囊胚双染的protocal,急用,谢了 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-1-10 00:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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哪位大虾有关于囊胚双染的protocal及注意事项,如果有您染好的图拜看一下就更好了,急用,谢了!

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沙发
发表于 2013-1-10 08:34 |只看该作者
在培养液中加入DAPI或Hoehst使终浓度为1ug/ml,37℃孵育10min,pbs洗3*5min,加PI使终浓度为50ug/ml,4°15min,再洗3*5min,就可以观察照相了,蓝而不红为死细胞!全程避光!!此外为了避免RNA的干扰还可以加点RNase100ug/ml
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藤椅
发表于 2013-1-10 09:28 |只看该作者
回复 希望之光 的帖子$ ?" R" s/ ?7 [5 t) ]' K

5 Q- p3 A6 `2 |& E3 g9 n多谢!您有没有染好的囊胚图,如果不介意的话,贴张图让大家学习学习

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板凳
发表于 2013-1-13 09:08 |只看该作者
回复 genedu 的帖子; x, B/ d9 i1 d1 a, Q: i7 W
# g* h7 _! J7 D5 G1 ~
呵呵 不好意思 我们实验室有人做 我不做囊胚 回头问他要一张哈

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优秀会员 金话筒

报纸
发表于 2013-1-14 13:17 |只看该作者
最好用抗体. D! d+ N( m: G2 a! B* I8 M
和一般染色方法相似6 u7 i5 d% g3 A. g" B
上面的所谓双重染色,看似是节约成本,效果好,其实,这样染色在处理过程中很难控制。甚至是不能控制。
8 z+ D% d  o: j: F3 E; z" [发文章上面的图片都是挑出来最好的。1 y+ D1 L% P. e3 K  ]6 L0 o
很难有好的重复性。- ~- A4 \. t6 ~8 V
你可以让一个人连着做3个囊胚,每次的结果差别都很大!
- U9 |/ ~8 f7 L/ k  ^+ ?我做过这个8 z! X! e: {  y! f9 a
抱质疑态度" d7 m0 ]. v' h4 `1 P, O
也可能我水平相对低一些
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