磷酸钙沉淀方法进行逆转录病毒的包装问题

wnavy200299

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) j0 e% Q% s9 t* Z7 h我们经常做这个，很简单，楼上的朋友说是没有混匀，我觉得倒没必要用vortex去震荡混匀，而且也不怎么方便。我们一般用peptte来回混匀几下（3~5下），就ok了，然后室温静置15min（没必要30min，反而不好！易形成絮状！！！！）。然后加至细胞板中！ 另外有的细节注意一下，就是最好用质量好点的CaCl2，我一直用sigma的（转染试剂已经省了，这个就不要节省了！哈哈~~，有一次我错用了fisher的cacl2，感觉效果不好！）。个人意见，仅供参考！祝你好运！

wnavy200299

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另外，忘说了，你应该知道的，就是配置好的CaCl2是需要用0.22um小滤器过滤，毕竟是转细胞嘛，当然是的无菌了。其他试剂也一样，都要保证无菌啊，什么自己弄得ddH2O。