关于液氮冻存细胞解冻的问题

老姜

我们冻干细胞融化时，在37°水浴摇动下融化至冰块约小红豆大小时，立即到洁净台上喷酒精消毒管壁，吸出融化细胞直接接种于培养皿中，加入10倍容积的生长液，次日全量换液，细胞生长状态非常好。因为DMSO是剧毒，37度下细胞与其接触10min，死的快，但经10倍稀释一点没问题。人们大多是将融化细胞直接加入8-10ml 的培养液或缓冲液中，1000r/min，离心5min，弃上清加入生长液，培养3天后换液也行。二者相比后者离心细胞可能会损失多点。

老姜

回复 wind789 的帖子
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没有做过这方面的统计。我感觉在实际应用中这个计数对我们所有人的实验欠有知道意义，因为标本源不同，离心机的半径不同，洗涤液的不同，同样转速下离心效果不一。个人见解仅供参考。