求助 人ASCs?

cartoonyang

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7 P$ d  ?/ `$ [( p
我们现在正在分离人的脂肪干细胞，目前是在做表型检测。买的是ABCAM 公司的一抗，CD90，CD73，CD105，还有HLA-DR, CD45. 还有买了Invitrogen 公司Zenon 的二抗进行标记，过流式，但是做了很多次（P2-P5代）都检测不出来。由于没有经过检测的人的ASC做阳性对照，目前无法判断我买的抗体是否有效。所以来这里求助大家；另外，如果哪位有经过鉴定的人ASC细胞，如可以赠送更好，如不行，本人愿意购买，以此检测所买的抗体是否失效？谢谢！
) A1 W) J3 t, Y7 _% M1 m

wind789

cartoonyang 发表于 2013-2-1 15:18
' L: e0 z- T; Y! m$ o" `+ w我们现在正在分离人的脂肪干细胞，目前是在做表型检测。买的是ABCAM 公司的一抗，CD90，CD73，CD105，还有H ...

( f/ A0 g" A+ x
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cartoonyang

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$ G- b; G0 k; j3 Z  o  r' O, |
2 \- z4 E5 U& X7 s9 T; e非常感谢wind789的热心的回复！！！

ditiger

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' R3 M% t( D! H) N0 i  ]8 F0 I
. Y/ d8 }' ?* V5 z' z一般是BD的抗体较好，而且一抗代荧光。; P$ j8 s: H" M8 J6 Q
ABCAM的抗体不发光么？需要加二抗。。。贴出货号，大家看看。

cartoonyang

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' Y; q/ d* _, |. C
0 _9 o: A" r' q4 q/ u抗体            货号                   公司
! P0 a2 w) {3 m8 j  H" M6 yCD105            ab2529                          Abcam
& h+ M4 \' k6 T; N5 Y! U6 bCD73           ab81720         Abcam
/ G: X1 i( H8 l1 Z4 d* \1 xCD90            ab225                         Abcam8 R" N  O7 g9 }4 V2 O: x$ K- p
CD45           ab30470          Abcam' W8 g4 s: U- Z: B& j& E
IgG1 control        ab18447        Abcam
1 W: ^7 q  Z$ |3 ^  sIgG2a  control        ab91361        Abcam
/ ?3 O" R" R! G. G. q; f  |8 Z" sAlexa Fluor488        Z25002        Invitrogen7 c. h6 Z, T! P" |8 `. b
R-Phycoerythrin(R-PE)        Z25055        Invitrogen
% m/ |6 J3 H% v9 i
+ u/ ^7 V0 [. _+ C+ N" h检测CD73，90，105都是阴性，真是奇怪。后来问医科大流式细胞实验室的老师，她说，在国内条件下最好用带标记的抗体。

s02260441

下列是我们用的抗体，确认都可以染的出来，我也认为确实是使用自带标记的抗体比较好进行分析。
  W2 O2 E$ t$ r( p" R9 C/ n0 J3 E/ [' w- C( r4 z
Invitrogen:9 c4 d; y. w' P* Z
IgG1-PE  MG104
% M* O  e* Y9 K: z) q+ v1 FCD34-PE CD3458104
8 z  C: s/ l1 Q  t: D1 y1 dCD45-PE MHCD4504
: O: \& Y- N6 M& Q+ r. mCD44-PE MHCD4404" M# i+ e3 C$ b. D# [3 N

+ ~2 D/ U: Y! d& G# ~2 cBD:4 U$ Y; Q. U+ X. y" t8 R8 ?
CD73-PE 550257
: l1 U5 g2 R# b: T1 gCD90-PE 555596

cartoonyang

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" O' @( B0 @3 `0 a: x: G# z谢谢 告知！！！