mips的传代问题

Yedan

1和2一起回答吧（问题差不多）：现在on feeder上的mES传代，基本都不需要贴feeder，即使你的ES是要去做EB或者别的什么实验（比如收RNA，直接连feeder一块儿用Trizol裂掉都行），老的feeder自己就飘了，第二天换液就没了，如果是48h换液的体系，传代后第二天看一下，飘的多换下液，如果不多就没必要了。至于贴feeder，确实是利用MEF和ES贴在gelatin板上速度不同，但是不代表说45min的时间里只有MEF贴而ES完全不贴，我不知道LZ你贴完之后看不看细胞的，你仔细观察，贴壁的细胞有大有小，大的是MEF小的是ES，但是飘着的细胞里也还是有大的MEF的，只是比例不同，贴的大部分是MEF罢了。
# a. v7 Y: d% h: ]$ y! dfeeder free culture，最头疼的问题是分化细胞去不掉，但是靠贴是去不掉的，只有通过挑克隆的方法去除（把分化的去掉或者把好的挑出来都可以），为什么贴feeder的方法不行，mES培养过程中分化的细胞只是失去了morphology的特点，严格地说是mixed状态的细胞，再差点也只是刚分化，Oct4肯定都还是阳性的（当然我说的是每次传代的时候出现的分化细胞啊，不是什么几天不管的细胞），这个离MEF还远了点。