怎样减少消化过程中产生的细胞碎片啊？？

猩猩

这段时间做的胎盘干细胞，在原代用胶原酶消化时产生大量的细胞碎片，严重影响细胞贴壁，求助各位大侠啊，是消化时间的问题吗？？？

yinfuhua

回复 猩猩 的帖子2 a# B+ t' Q' q' J

8 ~, m$ Y; F6 K- \. w你可以在胶原酶消化结束后多离心一次（900-1000转/min)，将碎片去除。试下。

jack1381818

除胶原酶消化结束后多离心外'操作環節與dpbs wish次數影響很大都是須注意

猩猩

回复 yinfuhua 的帖子* H* O% O2 E9 o# P
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我在消化结束后会快速离心3次，每次8秒，可还是有细胞碎片，请问您消化胎盘是用多长时间？？用37度恒温培养振荡器

孙帅帅

胶原酶法处理脐带原代费用比较高，不如用组织块法，虽然操作比较费时间，但是间充质细胞爬出率还是比较理想的。你可以尝试一下！

yinfuhua

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离心时多少离心力？时间这么短啊？消化时间大于3小时。

猩猩

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就是瞬间离心8秒，离心时间长的话，会残留大量的红细胞，所以用瞬间离心的方法，消化三个小时？？是不是太长了，那样会对细胞有损害的吧，请问您的胶原酶浓度是？？、

猩猩

回复 孙帅帅 的帖子; w* t* v+ r; W$ j7 ~4 R: d" s

# q3 d2 r* Q6 {$ Y! X; r4 U谢谢

yinfuhua

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0 q# n/ Z# C1 w2 s4 N1 @
胶原酶浓度是0.1%。

老姜

胶原酶消化法用摇床细胞活率低，用水浴中手摇效果会好些。