怎样减少消化过程中产生的细胞碎片啊？？

猩猩

这段时间做的胎盘干细胞，在原代用胶原酶消化时产生大量的细胞碎片，严重影响细胞贴壁，求助各位大侠啊，是消化时间的问题吗？？？

yinfuhua

回复 猩猩 的帖子4 |0 V! O& o8 X5 }

1 A. a6 F& s& \5 Q7 S% f你可以在胶原酶消化结束后多离心一次（900-1000转/min)，将碎片去除。试下。

jack1381818

除胶原酶消化结束后多离心外'操作環節與dpbs wish次數影響很大都是須注意

猩猩

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& r9 A9 a- ]) E3 u$ Y& ]- K4 d% S/ J/ l, _/ Y/ X. Q
我在消化结束后会快速离心3次，每次8秒，可还是有细胞碎片，请问您消化胎盘是用多长时间？？用37度恒温培养振荡器

孙帅帅

胶原酶法处理脐带原代费用比较高，不如用组织块法，虽然操作比较费时间，但是间充质细胞爬出率还是比较理想的。你可以尝试一下！

yinfuhua

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8 l# r+ t& ]2 o1 K! s6 R$ Q/ t, V
) r' h! S2 D% N# X2 W. h, Q离心时多少离心力？时间这么短啊？消化时间大于3小时。

猩猩

回复 yinfuhua 的帖子6 H1 \/ t: P& }3 d# x8 G( o9 u( l, M
' Z! z5 V8 c) R. J' m! [- q
就是瞬间离心8秒，离心时间长的话，会残留大量的红细胞，所以用瞬间离心的方法，消化三个小时？？是不是太长了，那样会对细胞有损害的吧，请问您的胶原酶浓度是？？、

猩猩

回复 孙帅帅 的帖子
  X: d5 Q2 \$ k3 R
& n! C: [' |. R+ \谢谢

yinfuhua

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2 L5 c& g) J. J1 a% R9 H( s# o; E  c: d$ A2 E
胶原酶浓度是0.1%。

老姜

胶原酶消化法用摇床细胞活率低，用水浴中手摇效果会好些。