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查看: 78052\|回复: 27	go 关于CIK试验中的一些问题，麻烦大家来解答一下，谢谢 [复制链接]

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楼主

发表于 2013-2-22 16:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

干细胞之家微信公众号

我这几天做实验，有几处不明白的地方，望高手解答，谢谢！
1.第0天加混有1000U/ml的IFN-r 1640培养基后，等24h以后，是把细胞离心后再加入含CD3和IL-2的完全培养基，还是直接在含有IFN-r的培养基中加入CD3和IL-2？？？ k5 w" S& h- E: K. L5 |9 F2 p
2.隔2-3天换液的时候，是要把细胞离心后再换只含有IL-2的完全培养基？？？还是直接在含有CD3和IL-2的培养基中添加IL-2的培养基？？？

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金话筒优秀会员积极份子

沙发

发表于 2013-2-22 16:51 |只看该作者

都是直接添加，无需离心。你不放心可以一分为二，做对照自己对比结果。

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金话筒优秀会员

藤椅

发表于 2013-2-22 16:56 |只看该作者

回复 113305060 的帖子" r$ [( x# I/ j! I3 [4 Q
, P$ U2 A6 v( |5 F! b& i
建议不要离心，离心后的细胞有可能会因为生长环境变化，1-2天内停止生长

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硕果累累_555

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板凳

发表于 2013-2-22 17:16 |只看该作者

不用离心，直接扩大体积即可。

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报纸

发表于 2013-2-25 08:43 |只看该作者

直接加就可以了，IFN-γ的作用是增加细胞毒性。

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地板

发表于 2013-2-25 09:30 |只看该作者

哦，那每次细胞换液的时候要不要将细胞计数一下，不然怎么能确定每次加的量是多少呢？

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7楼

发表于 2013-2-25 15:50 |只看该作者

直接在含有IFN-r的培养基中加入CD3和IL-2+ u0 @: X8 h8 r7 |
5 m! o& l: `0 T( D6 G: G
不用离心吧对细胞不好。。。细胞较少时经常动细胞，不利于细胞生长。。

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8楼

发表于 2013-2-25 17:13 |只看该作者

如果直接加含IL-2的培养液的话，那每次加多少，我隔一天加10ML可以吗？麻烦大家解答一下，谢谢

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优秀版主金话筒美女研究员

9楼

发表于 2013-2-26 09:29 |只看该作者

养细胞的过程需要时间慢慢摸索。

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小小研究员

10楼

发表于 2013-2-26 11:02 |只看该作者

回复 113305060 的帖子

你回复谁就点击对方回复帖子中的回复按钮然后输入内容像我这样

否则他会看不到

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