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CIK细胞换液问题,求解,谢谢 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-2-26 10:14 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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CIK细胞一般都是向培养瓶中添加含IL-2的培养基,是不是每次添加都要对细胞进行计数,保持每ml细胞量为1*10 6次方?一般是2-3天添加一次吗,每次都是扩一倍?求解答,谢谢
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13楼
发表于 2013-2-26 15:26 |只看该作者
我们每次换液时都是计数的,根据计数结果决定换液量,是半量换还是三分之二换。看起来麻烦其实也不麻烦,换液前总是要把瓶内细胞混匀的,然后取出一些用血细胞计数仪测数,再决定怎么换。换液间隔没有固定的时间,细胞长的快了就换的勤一些,长的慢了换液间隔就长些,一般的都隔天换,若是从1扩增成3 那么就三分之二换喽
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12楼
发表于 2013-2-26 11:15 |只看该作者
回复 113305060 的帖子5 f/ [1 }' ^% G7 L) T$ ]9 {: R6 A
* f8 ^6 K3 D9 C$ F1 q
也没必要隔天加。。后期等细胞长起来后,可以一次加几百。。 经常处理细胞也会增加污染的几率。
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11楼
发表于 2013-2-26 11:14 |只看该作者
回复 113305060 的帖子
: K, r! S9 n. j' t4 q& S2 }% l
, h8 w9 A" M* u0 K! ]. ^$ Q2 R楼主如果是搞科研的建议每次加液前给细胞记下数,如果是大规模的商业生产,就没必要计数了,细胞生长要有一定的细胞浓度,太低了不利于细胞增殖,太高了营养物质容易跟不上,细胞量大起来就扩一倍吧,不一定就是2-3天添加一次
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10楼
发表于 2013-2-26 11:08 |只看该作者
回复 cheeray 的帖子
6 y' f, P" F: W3 u4 P( `2 U4 Q' R3 r& v/ X
哦,明白了,那我一开始是20ML,后来补液是隔一天加10ML,应该差不多吧,我看文献说一般16-17天就可以收细胞了,达到10的九次方数量级。
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9楼
发表于 2013-2-26 11:07 |只看该作者
至于每次补液的体积。。要看你细胞的密度。。你可以根据你第一次加液的情况。看细胞密度大约是什么样子。。。然后细胞增值后。。加液前先混匀,在确定补加多少。。。差不多就可以了。。没必要那么严格。。
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8楼
发表于 2013-2-26 11:05 |只看该作者
不需要计数。。在显微镜下查看细胞状态。太密集了 就要加液。。。培养基太黄了 也需要加液。
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7楼
发表于 2013-2-26 11:03 |只看该作者
如果不是每次计数的话,请问一次补液补多少啊?我第一次养,没经验,呵呵
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地板
发表于 2013-2-26 10:38 |只看该作者
不用每次计数,那样很麻烦的。根据细胞长的快慢,而决定补液时间,通常隔一天补液一次。
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发表于 2013-2-26 10:28 |只看该作者
回复 ljl1988115 的帖子. N9 g4 E$ B' F$ ^8 ~9 A

) A* R; K/ w0 n9 z& [/ x7 M5 |哦抱歉打错了 扩大体积就是补液
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