饲养层加fgf后，细胞形状变长，变细，培养液很脏

yuhaoze

诱导ips的时候用的饲养层，确定了没有支原体污染，用MMC处理之后，不加fgf的时候细胞挺好的，加了fgf细胞形状就变得细长，而且很多细胞碎片，这样正常吗？会影响ips诱导吗？

yuhaoze

回复 king8 的帖子/ @( R3 H. i- v" b7 [; Z9 j& K

9 U* `. ^2 y2 y4 E) t+ T谢谢！

yuhaoze

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- ]9 R: X* i* R+ M: b; V, _% q8 L* z! z
那诱导的时候，是将病毒感染后的细胞接种到MEF之后，第二天换带有fgf的ES培养液吗？还是过几天再换？

yuhaoze

回复 Jonathan 的帖子( o3 _6 `+ {1 F* z5 p4 @! e
6 M% R' z1 G' U7 t2 B7 `. q0 \
我有matrigel，你说的铺完matrigel之后，就把感染完了的细胞接种上吗？
# h6 L) @6 ?( D% M' m2 a那培养液用的是ES完全培养液，还是conditioned培养液？$ ?  `) A/ f: ~4 ~4 f  M: K
我试过了，KSR media培养的MEF，跟用普通血清培养的形态差不多，不过一旦加上fgf之后就变脏了。+ X. _9 Z4 v! ~& M- f& G

yuhaoze

回复 Jonathan 的帖子* F% c# a8 D# J5 ]7 f5 z) k; n
1 X" b* Q0 B2 V+ [4 \
这是图片

yuhaoze

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* P3 P" v4 E0 w% c. P0 r; J  e) ]. A0 V7 h
图片
( d% }2 A; ^/ G$ X$ c2 h, F+ \; m

yuhaoze

怎么传不上图了呢

yuhaoze

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% q3 E: A6 t" E0 m3 g# d1 c4 M
" j/ Z3 b4 M) ^& w我看您说的这套体系是用于 maintaining human ips and Es.
  U$ |1 ?1 ^& j& Y也可以诱导ips吗？

yuhaoze

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8 M7 R4 A& x; H. \* v: a9 C
6 |+ c. {2 u( r0 {# b; r* S我现在已经能把病毒做好了，不过滴度不是用流式细胞仪做的，是数荧光数出来的。下一步就是诱导了。要是能不用feeder cell就省事儿多了。

yuhaoze

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8 h2 G8 z5 s$ H4 X$ i. L( T
& g6 h5 L- K2 n4 B能加您qq吗，您有空的时候想你请教一下细节