请教大家一个有关阻断信号通路的问题

ind6562

各位高人，我想用siRNA阻断我所培养细胞的wnt/β-catenin信号通路，有人能告诉我具体的步骤吗？
4 [' ~! ~; s: }" [) j我看的文献说是将能阻断β-catenin的siRNA先与转染液一起孵育形成转染复合物，然后将转染复合物加入到培养基中（请问大家这里是不是要用特殊的培养基，还有要不要加血清？），再用这个培养基处理细胞数个小时。请问是这样处理就行了吗，中间会不会还有其他步骤？还有一个极其重要的问题：这些过程是如何做到无菌操作的？4 m! E4 R/ O& q0 r; B) r2 u
如果有做过类似实验的人，能告诉我一下具体的步骤吗？感激不尽！

ind6562

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1 ?: M% m8 I( W& {8 h8 _4 ]) D不好意思，可以讲详细些吗？

ind6562

回复 monk125 的帖子, T! u% S/ D1 i: ~# F# _
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太感谢了！！

ind6562

回复 monk125 的帖子& W- S* q/ ?6 o) J4 _6 y9 {

- A( {7 O* C* h3 Y  l高人，不好意思，我想再请教您一个问题。好像做正式的转染实验前要做一个检测转染效率的实验（貌似是用荧光什么的来检测），但siRNA和lipo2000试剂盒里我没发现什么带荧光的东西（其实lipo2000说明书我已经看过，但里面很多内容我还不理解，惭愧~），是不是要另外买一个试剂来测转染效率呢，能麻烦您给我说明一下这是什么情况吗？