请教脐带华通胶间充质干细胞组织块培养的问题

hofo336699

最近在做脐带华通胶间充质干细胞组织块培养，有个问题请教各位大大2 t$ P+ ?) x  ?4 @2 k5 `9 V
我用的是Gibco的LG-DMEM（10%FBS），爬出的原代细胞，有梭形细胞，也有许多形状不规则的细胞，有点像神经细胞，但传到第三代就完全变成很大的树突状的细胞，是不是分化了，不知道是不是因为培养基的问题，请教各位都用的什么培养基啊？
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硕果累累_555

DMEM/F12培养基比较好，LG-DMEM低糖的培养基应该也可以，不过糖分高的培养基能够诱导干细胞分化，所以想要好形态的干细胞最好加些细胞因子控制下。

hofo336699

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3 S! G+ s3 g* j, a, L
我看我们实验室的Gibco DMEM/F12（货号11320）是高糖的啊，他家有低糖的吗，还是用其它牌子的. D2 m& a" G6 E, D8 M5 g$ o6 l
具体加哪些细胞因子呢，
, S. s: ?3 L$ B5 `5 k7 x! z还请赐教

硕果累累_555

回复 hofo336699 的帖子' n- {# |# Z$ |1 l2 k5 K

& m4 P1 K. r: n5 J2 zDMEM/F12(1:1)就可以啊 细胞因子首选BFGF啦

hybaoyu

DMEM/F12培养基比较好，我试过LG-DMEM，结果差不多的。

hofo336699

我查了下，gibco的DMEM/F12全是高糖的呀，是不是  DMEM/F12好用但需要加细胞因子防止分化，而LG-DMEM就不用加细胞因子但长得不如F12？

nek314

用成品的培养基吧，用基础的产品有分化的风险，效果也不一定好

硕果累累_555

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DMEM/F12(1:1)与DMEM(H)是有区别的，这是一种干细胞培养的基础培养基，不过DMEM（L）也是可以的，两种在培养过程中都要添加细胞因子，防止分化促进增殖的。浓度需要自己摸索出合适的就可以。

老姜

回复 hofo336699 的帖子6 r* G/ o9 U' ?+ G/ _; b0 u
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养间充质干细胞血清是关键，传３代细胞就传不下去，血清质量不行，细胞易分化。用间充质干细胞专用血清效果非常好，养细胞扩增量大，质量好，很省时间。

zhang861006

细胞形状不规则，有可能是你胶没有分离好，血管和外皮没有分离干净，建议最好做流式鉴定下，根据我经验组织块法养间充质，原代可以用20%的血清，传代是时候用10%的