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小鼠BMSC [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-4-2 22:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
原代细胞,现在已经是第六天了,但是细胞还是长的很小,还是圆型的,没有梭形的出来。用的是5周龄左右的小鼠,方法是参考论坛上的培养方法
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沙发
发表于 2013-4-3 08:24 |只看该作者
1、是不是你接种密度太大了,骨髓中MSC本就极少,密度太大而瓶底面积有限,会抑制细胞增殖与伸展。
) z8 _: U8 ]* ^* Y' F2、首次换液时间太早,细胞增殖速度就会减慢,如果你是24h全换液,就耐心的再等等吧!
5 A- v' O% V" v' k1 W+ Q3、再者你用到的试剂检查一下有没有过期的,尤其是血清,你加的百分比是不太小了。
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藤椅
发表于 2013-4-3 10:12 |只看该作者
回复 shagu 的帖子6 P& V. N) g; E6 u* h* n/ K
1 K0 d: r8 b. }# g1 {
我是一只小鼠接种一瓶,应该不算大吧;我首次换液是24小时,但是我前面有一次养的也是24小时换液,长的挺好的;试剂和血清都是新买的,血清是用的10%
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2013-4-3 10:24 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
我觉得可以考虑接种6孔板,分成几孔接种,降低接种密度,毕竟每一只小鼠还是存在个体差异。血清原代培养的时候还是应该考虑20%的。
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报纸
发表于 2013-4-7 10:01 |只看该作者
回复 shagu 的帖子" x$ |# a# [* ?' Y7 o

2 i" z+ }6 p, r  j7 f8 e) q( }请问首次换液是在什么时候比较好?我一般在三天的时候换
% ?" d5 g- G6 E% K0 i如果一只小鼠接种一瓶密度有点大,那多大的接种密度合适呢?. h# t0 t: m2 a1 f, W. X
谢谢赐教!
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地板
发表于 2013-4-7 16:02 |只看该作者
回复 ruth891005@yaho 的帖子
0 a, L- b$ x* {1 U: Z4 e) J. v" J. \6 Q$ K8 R
1、我培养都是48小时半换液,长得挺好,杂细胞多,得多传几代。
& l! `! _- L9 d2 f' I5 Q9 J7 c2、至于接种密度,和你每次的操作有很大关系,比如冲洗骨髓腔是否干净,剪干骺端的多少(大部分细胞聚集在干骺端),离心的转速和时间。
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发表于 2013-4-8 09:04 |只看该作者
回复 shagu 的帖子# _, J5 }- y; t5 [# B" `3 f
: _7 E0 P& g' x+ f# K- M
非常感谢!
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