脐带MSC真是mSC吗？还是成纤维细胞？

henryjia

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8 [$ }8 {2 g2 B" Z8 @
1 H: P; z0 M" G# ]8 }% R; a& i能请教你是用的什么培养基养脐带MSC吗？分化实验培养基是那种？分化时间有多长？) o: W; [- \, k5 ^, i- s$ A$ P

' q7 I2 O. N. U! ]& i! `# A是不是不能用骨髓MSC 的分化方法？

henryjia

回复 coffee.cat105 的帖子) A+ \9 `8 K6 {$ V' B, g8 r
7 a$ R! O1 F( r" V: m$ u1 ?2 \
我至少试了三个样本，成骨成脂最长达3周。

henryjia

回复 老姜 的帖子1 G7 n- l6 D( ]8 N! O0 W
; ]7 R# z  J- x% }, e
我对文献持怀疑态度，不知道各位同仁有没有自己试验成功的。' L. f- M* V% Z

& F( A5 I* s/ M) s; D很想知道，是不是真的可行。唉，进展缓慢，急呀！

老姜

回复 henryjia 的帖子3 _7 C9 d" A8 u. I: K3 ?) W( u, u
* f" H" a# V# o$ l- I, \0 j
分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为ＬＧ－ＤＭＥＭ，血清是Ｇｉｂｃｏ澳洲产的。

老姜

回复 henryjia 的帖子1 m* t6 d: N: Z3 W% v

# y, A' B- P0 I7 Z' U3 a脂肪诱导技巧：使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点，诱导约２０－３５天；
& ]8 f9 t9 g# S& h$ g0 A成骨诱导技巧：避光！试剂，换液均避光，少在显微镜下观察，多个样本时只观察一个样本，诱导约２０天以上。

henryjia

' w, r: `# e0 ~. n! q1 U' y
5 M$ o  L. N* l  A
回复 老姜 的帖子
+ X) v1 T5 y/ \+ @3 U  n  @! b6 i$ a, G8 Y
您有没有用R&D现成的那种分化添加剂？
1 R1 N# |+ }* A, B& K  A: |  r0 {  r7 m# k/ U7 G# Y) F
我做的可以观察到酯化液滴，但是很少。成骨很弱。
# P; E9 W, |1 l
+ E5 U. T3 d* X' c4 ^细胞形态非常好，流式结果也很好。所以很郁闷。& A  G7 ^4 A, [5 f$ ^
/ b  O- q' Q8 a6 ]- a' C- P" A
是否可以请教您的分化配方吗？ / X( Z* P4 i% _

/ r) N+ I+ S" e5 b( K: k请您指教。多谢
7 b5 A3 \& I" z' ^- P. o3 v( k1 G) u

weibin2002

干细胞会因为所处的阶段不同，诱导的条件和时间也有不同吧。骨髓的可以诱导成功，说明不是试剂的问题；可能诱导剂的浓度和时间等条件还需完善吧

老姜

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1 t. a6 P/ z8 W+ m$ G4 ]. t, _$ e: G9 l2 N! V( v3 b( x  h7 P6 d
成骨诱导：５０μＭ的Ｌ－抗坏血酸；１０ｎＭ的β－磷酸甘油钠；１０ｎＭ的地塞米松；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；补足ＬＧ－ＤＭＥＭ（避光，临用前加地塞米松）．
8 |- d2 O& a. N7 X" E2 v成脂诱导：完全诱导液：０.５ｍＭ的ＩＢＭＸ；１００ｍＭ的吲哚美辛；１μＭ的地塞米松；１０μｇ／ｍＬ的胰岛素；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；维持液：１０μｇ／ｍＬ的胰岛素、每三天换一次液，第一次用完全诱导液，第二次用维持液循环三个周期，一直用维持液换液，直至镜下见脂质滴形成，为使脂质滴多点，可多养几天。

henryjia

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8 l/ }, ~# d6 s" M5 i: i6 d' J! g3 M; r: c* t
多谢指教。