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脐带MSC真是mSC吗?还是成纤维细胞?   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-4-3 18:39 |显示全部帖子
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回复 henryjia 的帖子5 t. h2 y; O, R+ X+ b
9 Q9 q  E: y1 M8 W7 a& ^9 Q1 V
脐带间充质细胞是经流式、分化潜能、粘附性等间充质干细胞的实验研究证实具有间充质干细胞的特征。但是它诱导分化成功的时间(无论是成骨还是成脂细胞)远远长于人骨髓。骨髓细胞是成人体细胞,脐带间充质细胞毕竟更接近"胎"细胞(这样说不准确,但好理解)。也可以理解为它的细胞阶段多为早期祖细胞,也就是更接近干细胞阶段,将此诱导成为成熟的骨细胞或脂细胞“走”的时间要更长;骨髓细胞多含接近成熟阶段的祖细胞(典型的例子,机体一缺血,造血祖细胞立即启动分化为成熟血细胞以补偿失血),诱导成为成熟的骨细胞或脂细胞“走”的时间相对要段些。这也是我验证后的经验。分享!
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沙发
发表于 2013-4-5 01:27 |显示全部帖子
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/ m& M* w6 U: }% z, _
/ |! S: u. _5 f9 _) p分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为LG-DMEM,血清是Gibco澳洲产的。
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藤椅
发表于 2013-4-5 01:33 |显示全部帖子
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8 y3 `* ]' M; s0 `- n
+ T. k3 E( w+ g+ t, O& `脂肪诱导技巧:使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点,诱导约20-35天;8 ]6 E3 K: J1 \1 x/ n1 n
成骨诱导技巧:避光!试剂,换液均避光,少在显微镜下观察,多个样本时只观察一个样本,诱导约20天以上。
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板凳
发表于 2013-4-6 10:45 |显示全部帖子
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& q* q8 [5 \, I+ T5 i# m: h$ x3 k' ]7 @  W- n" y
成骨诱导:50μM的L-抗坏血酸;10nM的β-磷酸甘油钠;10nM的地塞米松;10%FBS;2mM的L-glutamine;100u/mL的P/S;补足LG-DMEM(避光,临用前加地塞米松).+ g) T# z3 n) [6 J$ v
成脂诱导:完全诱导液:0.5mM的IBMX;100mM的吲哚美辛;1μM的地塞米松;10μg/mL的胰岛素;10%FBS;2mM的L-glutamine;100u/mL的P/S;维持液:10μg/mL的胰岛素、每三天换一次液,第一次用完全诱导液,第二次用维持液循环三个周期,一直用维持液换液,直至镜下见脂质滴形成,为使脂质滴多点,可多养几天。
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