小鼠脾脏淋巴细胞在体外无刺激培养，3天内逐渐死亡？？？

Yorkshining

    最近一直在做ConA刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验，目前已经有了明显的增殖，但是遇到一个问题就是随着培养时间的延长（分别培养24h，48h，72h）,阴性对照组的淋巴细胞的OD值越来越低。导致72h后我算的刺激指数都快到20了，大家有没有遇到过这种情况啊，我接种的密度是10万/孔。。。

keren4808

请楼主说明实验条件，10万/孔是96孔板，还是48孔板。我们实验室分离人外周血单个核细胞在无刺激下可以生长一周的。

风雪叶杰

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& g* d3 R2 R0 h9 b6 z8 r你好，我想请问一下你们实验室培养外周血单核细胞的培养基是什么样的，加了哪些成分吗？我最近做小鼠脾脏淋巴细胞培养在无刺激的情况下总是不超过三天细胞就全部死了（苔盼蓝染色），不知道是为什么,我用的是RPMI1640 +10%FBS

细胞海洋

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风雪叶杰

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好的，谢谢