小型猪骨髓间充质干细胞长势不好，求指点

qiugt0819

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1 ?; k6 D' b6 x% v7 _这是P2的细胞，个人感觉主要问题一个长得不均匀，一团团的，另外杂质细胞多较多，而且单个梭形细胞形态也不好，细胞质里面较多杂质。
' p+ f) F; O  [3 j请高手们指点哪些方面会出问题。原代是抽骨髓FIcoll液离心培养的，问题主要考虑：1、ficoll离心过度致细胞损伤比较大；2、原代传代时已经有一部分细胞融合了，接触抑制大量细胞老化；3、接种时没吹匀细胞；4、血清问题。# }% P* v0 I5 h0 R
欢迎大家踊跃提出意见，谢谢！

songdianyin

培养基什么成分？

songdianyin

P2第几天这是？

songdianyin

接种密度？

老姜

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这个细胞接种后应该已长了几天，看图是长的不错，你所说的“成团”，实质是一个细胞克隆出的细胞自然围在它的周围，单细胞形态不好一般与FBS的质量关系较大，你见过小型猪细胞比这形态好的吗（我没养过这类细胞）？若没人家好，血清的问题较大。

qiugt0819

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DMEM\10％fbs\NEAA\双抗

qiugt0819

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5 R8 [6 r, p$ v& }P2第五天了

qiugt0819

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2 Y2 o8 R% N" l  t谢谢指教，这也比我之前养的好了，但跟实验室别人养的牙髓间充质干细胞相比差很远，大家都说我细胞状态不好，所以请大家给点意见

mkhorse

感觉细胞状态确实不好，把原代和P1的细胞图片传上来看看。

henryjia

有没有发现传代时，细胞脱壁时间延长，有很多细胞不收缩，或者保持贴壁？如果是这样，那说明细胞已经开始分化了。你的培养基是从哪里找来的？感觉不是太对。不过我也没养过猪骨髓MSC。经验之谈，仅供参考。