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小型猪骨髓间充质干细胞长势不好,求指点 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-4-10 08:50 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 qiugt0819 于 2013-4-10 08:52 编辑
4 A' I! @& ?9 J) g
5 l7 \9 `. w0 n" r* q$ C这是P2的细胞,个人感觉主要问题一个长得不均匀,一团团的,另外杂质细胞多较多,而且单个梭形细胞形态也不好,细胞质里面较多杂质。
5 g- Y: d3 M# B$ d请高手们指点哪些方面会出问题。原代是抽骨髓FIcoll液离心培养的,问题主要考虑:1、ficoll离心过度致细胞损伤比较大;2、原代传代时已经有一部分细胞融合了,接触抑制大量细胞老化;3、接种时没吹匀细胞;4、血清问题。
* f( @, ^7 ]+ e! T欢迎大家踊跃提出意见,谢谢!
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沙发
发表于 2013-4-10 10:39 |只看该作者
培养基什么成分?

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藤椅
发表于 2013-4-10 10:40 |只看该作者
P2第几天这是?

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板凳
发表于 2013-4-10 10:40 |只看该作者
接种密度?

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报纸
发表于 2013-4-10 11:45 |只看该作者
回复 qiugt0819 的帖子
  H8 S2 t$ ~) R' Q) q4 X4 P8 h/ g, Q2 @" }7 T
这个细胞接种后应该已长了几天,看图是长的不错,你所说的“成团”,实质是一个细胞克隆出的细胞自然围在它的周围,单细胞形态不好一般与FBS的质量关系较大,你见过小型猪细胞比这形态好的吗(我没养过这类细胞)?若没人家好,血清的问题较大。
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发表于 2013-4-10 21:37 |只看该作者
回复 songdianyin 的帖子
. _1 i6 i5 J6 Q& O' b9 S0 l) r
' @( l! q8 g1 R# d+ JDMEM\10%fbs\NEAA\双抗
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发表于 2013-4-10 21:38 |只看该作者
回复 songdianyin 的帖子# Y2 }# C% d: J9 @! ?1 d
9 Q/ P' t  p: Z, s1 S
P2第五天了

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发表于 2013-4-10 21:39 |只看该作者
回复 老姜 的帖子
% S5 f  F- `% J6 w) j  o5 g8 I; \* @2 j
谢谢指教,这也比我之前养的好了,但跟实验室别人养的牙髓间充质干细胞相比差很远,大家都说我细胞状态不好,所以请大家给点意见
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发表于 2013-4-12 10:09 |只看该作者
感觉细胞状态确实不好,把原代和P1的细胞图片传上来看看。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2013-4-17 04:02 |只看该作者
有没有发现传代时,细胞脱壁时间延长,有很多细胞不收缩,或者保持贴壁?如果是这样,那说明细胞已经开始分化了。你的培养基是从哪里找来的?感觉不是太对。不过我也没养过猪骨髓MSC。经验之谈,仅供参考。
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