请教为什么feeder飘起来

sandrazz

在feeder上诱导的过程中，12天的时候feeder边缘开始脱落，随后脱落部分变大，最后会像一张膜一样整片飘起。IPS克隆也一直没有出现，做了两次都是这种情况。
" Z& y- w) X4 ~! U问题是第一次做病人和正常人的iPS诱导，正常人一切顺利且出现克隆，所有实验条件一样但病人IPS就没出现且feeder脱落，第二次重做了病人iPS诱导，又是这种情况。
3 `# b1 ^7 k2 F% e  e1 i% a, S2 v2 c请问大家有谁能给点意见。从包装病毒到诱导培养要近一个月的时间，克隆出不来前期工作都白费了，而且病人的体细胞资源珍贵，经不起浪费啊。

zpzp0312

一般来说饲养层能够正常生长的时间在1-2周，但是通常都是慢慢脱落的，当然，慢慢脱落是不会对克隆形成有太大影响的，即使克隆形成不理想，当尺寸足够大时转移到新鲜饲养层后还是有一定比例状态良好的细胞保存。所以说饲养层的死亡不是关键
8 E* ^; f2 i5 D7 y1 b但如果是一层脱落，那就要考虑是不是培养液更换时，温度、pH变化过大造成这个情况。一般来说这样的情况都是在更换新鲜培养液后出现

supercell

feeder凋亡是诱导中遇到的常规问题，建议7到10天时以一半密度数量补充新鲜feeder或将诱导培养基更换为CM，这一点很重要，否则你的feeder根本不足支持克隆出现。（一般正性克隆出现需要19天左右，供参考）

almasun

支原体污染？