请问心脏冰冻切片需要甲醛固定，蔗糖沉底吗？

moluxingke

不同的实验室习惯还真不一样。比如固定剂有的实验室偏好PFA，有的喜欢NBF，等。你问的有点笼统，如果只是做个切片，观察个形态或是做组化荧光之类的，可以不用蔗糖处理，组织可以预先固定也可以切成片子之后固定。如果要做lacz染色之类的话，就需要用蔗糖处理了。切片之后还需要固定一下。

moluxingke

放冰袋中？放了大约多久？我们一般是取了放在液氮中迅速冷冻，这样可以更好的保护蛋白减少降解。而且如果冷冻过慢的话，组织内容易产生冰晶。这样组织结构就容易受损。) z( n" i, E. {" P
切片后，如果准备做免疫荧光，那可以拿切片固定，固定剂不一定是PFA，也可以是甲醇、丙酮之类的。
! P; y' g1 c8 m3 Z$ f) |如果对自己的方法有疑问，那你可以顺带上c-Kit的阳性组织作为阳性对照。

moluxingke

应该可以的，不过我没有这么做过，呵呵，如果不立即做，我是先冻存，然后用的时候晾干，固定。