培养CIK，你用几个培养袋？你的细胞数量是多少？

wwxx66

培养CIK，一个病人你用几个培养袋，你们的培养体积是多大？你的细胞数量是多少？欢迎大家参与讨论。怎样既节省耗材又能达到细胞数量？

wwxx66

回复 aochongyu 的帖子# j0 e0 b, _8 T& O6 N0 V9 G8 `6 q

: p& a8 f* s; `7 E3 U2.2L长不到500亿细胞，用一般的培养基/551就可以，2.5L左右，14天下来能培养到100亿细胞。你说的500亿细胞，量太大了!

lyj-0017

回复 weijunning 的帖子
2 m# X; t7 e1 [  |! R
) M, W+ W: b  A& Z那我明白了，应该会加retronectin、PHA和抗CD28单抗之类的一些因子吧，这样的话成本会高不少吧？如果降低成本用国产的，估计细胞培养的效果也应该不会太好

weijunning

回复 lyj-0017 的帖子
3 R" `5 Q$ R$ y' l5 B$ I: _0 J8 [
5 T/ E/ ?4 n' z, _% h) Q9 ~我们因子的种类加的多一些

lyj-0017

回复 weijunning 的帖子% x; U& A7 r; T' i' U  }

# _6 U+ b( L7 h你们的外周血方案是按照经典的那种培养方式，也就是D0加IFN-r，24小时候加CD3单抗和IL-2吗？

weijunning

回复 lyj-0017 的帖子
) W+ m6 M8 X7 z& V7 |$ O3 K8 H& C9 L
你说的没错，我们初识铺的培养基也就10ml左右的样子，一般在瓶中培养3~4天，就会达到108，这时按照1X106/ml转袋，将细胞放入培养袋中进行培养。最后回输时，基本上单次都能达到109.* _  h! E  u' J) d! X  S5 e2 L, a( ]

lyj-0017

回复 weijunning 的帖子; {- }7 v# y$ J7 t% E/ c0 ?

0 I! \! S( W. I1 o+ ?' K0 B如果是直接采集50ml外周血，按照分离得到2X10^7个PBMC，且铺瓶密度按照1.5-2X10^6/ml来算，初始培养基量也就是10多毫升的样子，按照这样的培养方式，培养一次最多能达到多少CIK细胞呢？

weijunning

回复 lyj-0017 的帖子6 x9 v1 J0 q2 F6 R

( X. N  f1 v  q4 n8 c4 U1. 我们一般直接静脉抽取50ml外周血，这样得到的细胞量是非常少的，顶多2X107个PBMC。如果是使用采血仪进行外周血单个核细胞采集，那采集到的PBMC是很多的，一般是109个细胞。
! r8 g0 F5 o8 s% b2. 我说的铺瓶密度越大越好，只是针对我们直接静脉抽血外周血提出的PBMC。对于机器采集的PBMC，初始铺瓶2X106/ml. 9 r$ s! E& _6 W; J
3. 我们对直接静脉抽取的血样和机器采集的血样，进行细胞培养的SOP是不一样的，加因子顺序也是不同的。
, Z* v$ T: f5 H+ Q& [1 g) c# p  c' y

momoenn

也得考虑初始接种细胞数吧？

lyj-0017

回复 aochongyu 的帖子
7 {  @5 l, _+ k1 \" `2 D% {, i9 p7 ]. _4 f
将这些絮状物吸走后，对初始细胞密度没影响吗？