干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 15102|回复: 6
go

[请教] percoll细胞分离液使用问题 [复制链接]

Rank: 2

积分
268 
威望
268  
包包
1266  

优秀会员

楼主
发表于 2013-4-23 22:47 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我在看文献的时候看到有学者使用percoll细胞分离液分离胸腺上皮细胞,而我看试剂公司出售的percoll分离液都是用于分离淋巴细胞的,丝毫没有提到能分离组织细胞,所以请问有谁做过这方面的实验,望指教!再就是ficoll-hypaque淋巴细胞分离液能用于分离组织细胞吗,其密度梯度又怎么设置呢?谢谢
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
1013 
威望
1013  
包包
2639  

金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2013-4-24 00:24 |只看该作者
细胞有不同的形态和密度,通过离心,会稳定在percoll不同的梯度中,因此可以分选细胞。我们做睾丸细胞的分选就是消化成单细胞直接上percoll的,至于你所说的上皮细胞,看看有没有文献报道他会稳定在哪个层中,不然就得自己摸条件了
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 8 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 8  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
268 
威望
268  
包包
1266  

优秀会员

藤椅
发表于 2013-4-24 17:31 |只看该作者
回复 w343989328 的帖子2 x$ O* t+ K. @+ {

# g+ b# R: L" W: ?- J恩,文献里说的可以分离,用的是30%、50%、70%梯度的percoll液,只不过我看产品的说明书,他们说是分离淋巴细胞的,我不确定能用否。再就是ficoll-hypaque淋巴细胞分离液用的是不同密度梯度的,可是那个产品我问销售人员,他们说只能用于分离淋巴细胞,我纠结了。。。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
312 
威望
312  
包包
1121  

优秀会员

板凳
发表于 2013-4-25 11:42 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
分离液有好多个密度梯度的,可以选着合适你的密度梯度的分离液,效果会好很多。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
28 
威望
28  
包包
171  
报纸
发表于 2013-4-25 16:06 |只看该作者
我也只用过淋巴细胞分离的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
134 
威望
134  
包包
310  
地板
发表于 2013-4-27 12:10 |只看该作者
没有问题的,浓度梯度都是可配的,但是具体情况要按照自己摸索,如果没有相关文献的话。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
52 
威望
52  
包包
175  
7
发表于 2013-4-29 13:21 |只看该作者
组织细胞是可以做的。可以先搜一搜文献,没有的话使用夹逼法也是可以摸索一下的,需要注意的是,在摸索的过程里,时间要短,转速不要太高,一点一点加上去。我自己的感觉是,不同品牌的percoll或者ficoll液,对于转速和时间或者梯度的设定都是不一样的,所以换品牌的时候都要上上下下调整一下的。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 8 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 8  包包 + 20   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-6-27 18:27

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.