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关于冻存   [复制链接]

江如练

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楼主
发表于 2013-4-28 17:59 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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不知道各位冻存ADSC的时候冻存液的配方是什么，是只用血清么
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wxdang

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19楼
发表于 2014-12-1 14:15 |只看该作者
DMSO复苏很关键，如果掌握不好温度，细胞很容易死掉的，主要DMSO的毒性。
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mecol

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18楼
发表于 2014-12-1 13:48 |只看该作者
不同的细胞冻存方法不一样的吧？干细胞的冻存要不要加抑制剂呢？我冻存过成纤维细胞，就用培养基：DMSO=9:1，-80过夜，第二天液氮，复苏的挺好。
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yizuiqiannianga

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17楼
发表于 2014-12-1 13:32 |只看该作者
我们都是血清加DMSO。按9:1，没问题啊
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绝对忠橙

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16楼
发表于 2013-12-11 10:03 |只看该作者
血清：dmso在9：1，细胞密度控制在（1×10的6次方到1×10的7次方）/mL，在4°冰箱放置10分钟左右，感觉冻存管已经变凉以后转入-20°冰箱，20分钟取出可以看到已经冻成固态，转移入-80°冰箱。复苏的时候会有一些细胞飘起来，但是影响不大。希望能有帮助。
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shuimochunlan

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15楼
发表于 2013-10-31 10:38 |只看该作者
建议楼主考虑下 Mem：FBS：DMSO =5：4：1的比例，我们都用的这个，效果还是不错的
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漫步云端0511

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14楼
发表于 2013-10-31 10:21 |只看该作者
冻存密度很重要，操作过程一定要快。
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三月桂花香

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13楼
发表于 2013-5-9 14:20 |只看该作者
细胞悬液中加1.5ml 4℃预冷30min的含20%DMSO的冻存液
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江如练

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12楼
发表于 2013-5-8 20:21 |只看该作者
回复 supercell 的帖子& x% n, m1 ~8 f( R3 Y& H
1 `5 \6 y5 a) R# [8 O9 r) v/ B( f% c. P* X
我的细胞传了代以后就会变得很大，铺的特别开而且颜色浅不容易看见这是咋回事额
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倔强的投手

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11楼
发表于 2013-5-3 00:38 |只看该作者
用血清+10%DMSO，或者培养基+10%DMSO都是可以的，我都用过，复苏后细胞挺好的啊- m* V! c. e& R4 a( ~7 `. E
不过细胞早-80不要太久，长期保存的话还是要放液氮  S7 b- q" d/ s' U8 Z7 P2 w
不过我们实验室有的细胞在-80放了两年，照样可以复活
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