骨髓间充质干细胞成脂、成骨诱导分化

李兰兰

sd大鼠骨髓间充质干细胞成脂、成骨诱导分化10天后，显微镜下观察细胞上面明显有黄色的东西，不知道是什么？诱导21d后，没有染上颜色，不知是什么原因？

李兰兰

回复 漂泊的风 的帖子4 L- E2 B# Y8 R& n  ]* L: ]
' U, f. g& F" @0 W
谢谢，已成功诱导！

李兰兰

回复 supercell 的帖子$ q0 a' I& [" h  ?! ]
' _4 M4 ~+ h" y; r7 W9 t
诱导成功了，嘿嘿

李兰兰

回复 shagu 的帖子
$ m  {7 y7 E6 \5 J3 @; L; W3 ?! k4 i% ~3 f3 W/ X
不好意思，才看到你的留言。我诱导大概20d左右，染色比较明显的。感觉的你时间还不够吧。另外看你的图片感觉染液块状的东西比较多。你接种的密度大概是多少？我诱导的细胞液是满密集的
8 m8 U, w- }8 `

李兰兰

回复 shagu 的帖子
! j  m2 r' a1 F: O! H
1 t1 u: P. b5 G7 E1 M4 x% M  X" i* K- n我大概是2×10^5/孔密度接种于6孔培养板,成脂的时候可以明显看到很多圆圆的脂滴，成骨的话不感觉是细胞上沉积了一些钙盐。成骨我是直接用的茜素红染色的，成脂用的油红O染色的。

李兰兰

回复 shagu 的帖子
) J  C, \/ Y/ j
9 J. x6 ]8 A. V+ ~0 T  a  D# ~我大概是2×10^5/孔密度接种于6孔培养板,约８０％融合时开始诱导，成脂的时候可以明显看到很多圆圆的脂滴，成骨的话感觉是细胞上沉积了一些钙盐，但不是很明显。如果你的细胞活力还可以的话，建议可以多诱导几天，这样染色图片更漂亮。成骨我是直接用的茜素红染色的，成脂用的油红O染色的。7 ?! ^! ?% O3 T" k( m3 U
另外ＰＢＳ我实验室用的是配好的呈瓶的，自己没有配。8 R" g4 \- O  r) g. w3 X# n
我当时预实验是成骨、呈脂分别诱导了三个皿，这样便于观察，可以不同的诱导时间染色，不然染色失败的话，时间等的太久。结果染色图片还是蛮漂亮的。& U( h! ?& ^, L1 V: B
不知道你的间充质干细胞有没有做过鉴定呢？我的做了流式细胞仪细胞表面抗原鉴定。5 S# M# P1 ~5 S; C$ V; y
建议你的呈脂诱导时间长一些，１０ｄ不够吧。
3 n% O6 l' l: z0 P以上仅是参考，不知你诱导液成分。

李兰兰

回复 shagu 的帖子# V2 e4 n* a$ h) d  V* W  `0 i2 A, H

( y2 {( z# n5 S+ k* A5 ^另外染液油红O一定要过滤或者离心，不然染液的絮状物影响图片质量。# f+ J! N' y/ V  V/ j7 i/ X
你做间充质干细胞哪方面的实验啊？