求讨论：悬浮细胞诱导iPS

DNAngle_RNA

最近在做关于悬浮细胞诱导iPS的实验，求高手介绍经验，指点迷津！

jiaozi

你好，请看附件的文章，是广州生物医药与健康研究院所长的文章，是关于评论悬浮细胞诱导ips题目为reprogramming in suspension
) J% C! n% \  f4 v( ^http://pan.baidu.com/share/link?shareid=502077&uk=236230318

DNAngle_RNA

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9 o  {0 ?  ]0 f8 X2 _7 B3 i) A+ [
! t3 s) V  W9 Y5 T6 I理论讲的很好，但是太抽象了，解决不了我现在遇到的问题……

wangshumin12311

问楼主，悬浮诱导意义何在，能解决神马问题

DNAngle_RNA

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3 i# ]+ ]) i" p
3 d4 h- B. G+ t, I1 ~5 C, s8 H) z因为很多细胞是要悬浮培养的，比如血液类细胞

Jonathan

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6 L0 s$ E7 [3 V/ [* G) N3 \8 y  ?' u( p2 e
我做ips这么久了。血液细胞悬浮诱导已经是轻车熟路了。直接分离，然后用nucleofetion，转那几个episomal的因子，然后扔到matrigel或者feeder上面。一个星期就有ips克隆了。

DNAngle_RNA

回复 Jonathan 的帖子# [) H! W& N, S" k% w/ R
( A) K, [8 U; y( P% V, ~
如果是用慢病毒呢？做了两次，感染效率很低，只带GFP的慢病毒感染效率也很低，请问有没有提高感染效率的方法？谢谢

Jonathan

回复 DNAngle_RNA 的帖子- `9 _0 }/ G, B1 p3 W

3 k8 N, f  _+ z) Q+ IMOI多少？慢病毒我也做过，效率很好的

DNAngle_RNA

回复 Jonathan 的帖子+ \# q1 A4 [9 X2 J8 r# c
1 g8 n  m1 h4 a; ]& o  E6 m
做过梯度，5，10,20,50MOI，效果都不太好，慢病毒是买来的，质量肯定没问题

老十

这个natureprotocol上有文章介绍吧