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求讨论:悬浮细胞诱导iPS  

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包包
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发表于 2013-5-20 11:31 |显示全部帖子
最近在做关于悬浮细胞诱导iPS的实验,求高手介绍经验,指点迷津!
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包包
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发表于 2013-5-20 14:54 |显示全部帖子
你好,请看附件的文章,是广州生物医药与健康研究院所长的文章,是关于评论悬浮细胞诱导ips题目为reprogramming in suspension
$ g; M  j" N/ ~& ]4 N' U2 q/ ~9 hhttp://pan.baidu.com/share/link?shareid=502077&uk=236230318
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发表于 2013-5-21 09:58 |显示全部帖子
希瑞干细胞
回复 jiaozi 的帖子! e! w6 \! C$ P" h! U: R

$ v' {1 o9 z' P$ X. ?: r理论讲的很好,但是太抽象了,解决不了我现在遇到的问题……

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包包
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发表于 2013-5-24 14:13 |显示全部帖子
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问楼主,悬浮诱导意义何在,能解决神马问题

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发表于 2013-5-27 09:12 |显示全部帖子
回复 wangshumin12311 的帖子2 y# o' |; Q7 E; b8 P; x

( ^& S7 L" p( M* E2 v因为很多细胞是要悬浮培养的,比如血液类细胞
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专家 优秀会员 金话筒

发表于 2013-5-28 13:24 |显示全部帖子
回复 DNAngle_RNA 的帖子% {& p7 q" ?2 f. ]$ f1 r  h( A
4 C. G4 a% `# S3 r1 ]
我做ips这么久了。血液细胞悬浮诱导已经是轻车熟路了。直接分离,然后用nucleofetion,转那几个episomal的因子,然后扔到matrigel或者feeder上面。一个星期就有ips克隆了。
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发表于 2013-5-29 09:05 |显示全部帖子
回复 Jonathan 的帖子7 ^1 T! C5 f7 C# e. Z; T! w+ }
, x4 n- Y5 f7 J$ A7 Q
如果是用慢病毒呢?做了两次,感染效率很低,只带GFP的慢病毒感染效率也很低,请问有没有提高感染效率的方法?谢谢
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专家 优秀会员 金话筒

发表于 2013-5-29 10:57 |显示全部帖子
回复 DNAngle_RNA 的帖子2 I: {* R$ s: D2 M/ W

- s( \3 @- q* K5 h% s- sMOI多少?慢病毒我也做过,效率很好的
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发表于 2013-5-29 11:01 |显示全部帖子
回复 Jonathan 的帖子: Y1 V4 ^# V4 [( f  Y- R- t
4 L( a# f1 U0 T" Z
做过梯度,5,10,20,50MOI,效果都不太好,慢病毒是买来的,质量肯定没问题
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发表于 2013-5-29 17:55 |显示全部帖子
这个natureprotocol上有文章介绍吧
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