求讨论：悬浮细胞诱导iPS

DNAngle_RNA

最近在做关于悬浮细胞诱导iPS的实验，求高手介绍经验，指点迷津！

jiaozi

你好，请看附件的文章，是广州生物医药与健康研究院所长的文章，是关于评论悬浮细胞诱导ips题目为reprogramming in suspension
0 |4 p  U, g) W7 J2 [. p. X4 _$ hhttp://pan.baidu.com/share/link?shareid=502077&uk=236230318

DNAngle_RNA

回复 jiaozi 的帖子5 s5 r1 f- D6 u9 p- s3 i

0 y8 K7 e6 ]0 m4 N. L4 L4 P理论讲的很好，但是太抽象了，解决不了我现在遇到的问题……

wangshumin12311

问楼主，悬浮诱导意义何在，能解决神马问题

DNAngle_RNA

回复 wangshumin12311 的帖子
4 ]7 n6 M  h6 h- Y4 M  F( n+ A+ C5 O# z/ }/ A: N" @
因为很多细胞是要悬浮培养的，比如血液类细胞

Jonathan

回复 DNAngle_RNA 的帖子5 u  k# L+ X# w4 ?+ n: P8 v

2 y0 d* O0 G* i8 v我做ips这么久了。血液细胞悬浮诱导已经是轻车熟路了。直接分离，然后用nucleofetion，转那几个episomal的因子，然后扔到matrigel或者feeder上面。一个星期就有ips克隆了。

DNAngle_RNA

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6 t% m* g3 K0 Q: @5 L) D9 s
/ U& r) D* s9 A如果是用慢病毒呢？做了两次，感染效率很低，只带GFP的慢病毒感染效率也很低，请问有没有提高感染效率的方法？谢谢

Jonathan

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4 {1 u# }  {0 B2 l4 w
! O. n' ?$ r/ G2 jMOI多少？慢病毒我也做过，效率很好的

DNAngle_RNA

回复 Jonathan 的帖子. ?+ M$ J3 x9 N* D$ x5 t, j

1 u) y+ P, ?. ]& s8 [# J做过梯度，5，10,20,50MOI，效果都不太好，慢病毒是买来的，质量肯定没问题

老十

这个natureprotocol上有文章介绍吧