求讨论：悬浮细胞诱导iPS

DNAngle_RNA

最近在做关于悬浮细胞诱导iPS的实验，求高手介绍经验，指点迷津！

jiaozi

你好，请看附件的文章，是广州生物医药与健康研究院所长的文章，是关于评论悬浮细胞诱导ips题目为reprogramming in suspension
) Z8 O8 c% l% F4 Z' i( ?http://pan.baidu.com/share/link?shareid=502077&uk=236230318

DNAngle_RNA

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/ z5 [- E5 y: c: I
6 p. Y- D* b5 q2 M# `理论讲的很好，但是太抽象了，解决不了我现在遇到的问题……

wangshumin12311

问楼主，悬浮诱导意义何在，能解决神马问题

DNAngle_RNA

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- l( V; Z" d4 b" h4 E& {/ P! U  L( I0 C( p0 w6 v# ]
因为很多细胞是要悬浮培养的，比如血液类细胞

Jonathan

回复 DNAngle_RNA 的帖子. \" B  E* F3 n9 F
5 y  `9 V/ w! I) Y+ [, h9 a
我做ips这么久了。血液细胞悬浮诱导已经是轻车熟路了。直接分离，然后用nucleofetion，转那几个episomal的因子，然后扔到matrigel或者feeder上面。一个星期就有ips克隆了。

DNAngle_RNA

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% y6 q2 n6 J; Q" }1 }7 Q0 C2 Z/ Q
! |5 E! H6 t: C# I3 l  k如果是用慢病毒呢？做了两次，感染效率很低，只带GFP的慢病毒感染效率也很低，请问有没有提高感染效率的方法？谢谢

Jonathan

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4 j7 Q5 w; w2 `0 g5 E
1 k* @! p6 B! RMOI多少？慢病毒我也做过，效率很好的

DNAngle_RNA

回复 Jonathan 的帖子; _6 t$ o/ E: ^( h3 P7 p8 V
6 W9 W# E& \+ U( `9 \7 O$ V7 S
做过梯度，5，10,20,50MOI，效果都不太好，慢病毒是买来的，质量肯定没问题

老十

这个natureprotocol上有文章介绍吧