求讨论：悬浮细胞诱导iPS

DNAngle_RNA

最近在做关于悬浮细胞诱导iPS的实验，求高手介绍经验，指点迷津！

jiaozi

你好，请看附件的文章，是广州生物医药与健康研究院所长的文章，是关于评论悬浮细胞诱导ips题目为reprogramming in suspension# Z2 s9 O. Z& g5 j$ e
http://pan.baidu.com/share/link?shareid=502077&uk=236230318

DNAngle_RNA

回复 jiaozi 的帖子1 K5 Y( ~% N  `9 j
! b. O& p7 P3 j3 o  R
理论讲的很好，但是太抽象了，解决不了我现在遇到的问题……

wangshumin12311

问楼主，悬浮诱导意义何在，能解决神马问题

DNAngle_RNA

回复 wangshumin12311 的帖子4 [7 |1 j% M* O% u- b# w) N6 i
' G/ Q* {0 m4 |/ Q. M% F4 b
因为很多细胞是要悬浮培养的，比如血液类细胞

Jonathan

回复 DNAngle_RNA 的帖子; Z$ l2 d- g$ C% u
. ^8 u3 ^4 U: I2 A' K) T& n
我做ips这么久了。血液细胞悬浮诱导已经是轻车熟路了。直接分离，然后用nucleofetion，转那几个episomal的因子，然后扔到matrigel或者feeder上面。一个星期就有ips克隆了。

DNAngle_RNA

回复 Jonathan 的帖子) A7 F* Q" U8 t- w
. J$ D# m; v: |; E
如果是用慢病毒呢？做了两次，感染效率很低，只带GFP的慢病毒感染效率也很低，请问有没有提高感染效率的方法？谢谢

Jonathan

回复 DNAngle_RNA 的帖子* S) N* K$ O3 j  G; V7 E% N7 J. U! {

3 h5 t; y* }* r9 M: m( w7 NMOI多少？慢病毒我也做过，效率很好的

DNAngle_RNA

回复 Jonathan 的帖子# Q0 x% F2 g9 ?4 h" Y
) S; g+ |; E) R& u* h" {9 G
做过梯度，5，10,20,50MOI，效果都不太好，慢病毒是买来的，质量肯定没问题

老十

这个natureprotocol上有文章介绍吧