关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

xiangyu83

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第一个问题： 是的。二抗必须指向一抗同型。: }4 i- n5 e% R' n1 g9 I$ M
第二个问题：一般实验不必区分亚型。IgG类的二抗是通用二抗，可以和各个不同亚型IgG结合。
  I' d$ v- e/ P& E4 X以下是一些常识（copy）:. C, c+ s  Z+ m/ T! S; K. }
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体.( F* F; o& ~- l, W
单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗体。
( D8 d, y+ o: w' l. G2 ~如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。& I/ c& ~& F9 p; ^* R3 u
如果你不知道一抗是哪一类别或亚类，那么抗小鼠IgG是一个不错的选择，因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

xiangyu83

回复 请叫我晓白 的帖子) O) k, T; N) U2 Z1 j1 E& c2 ?( }

- f6 |6 `" h3 w0 Z& n不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

xiangyu83

回复 请叫我晓白 的帖子3 h; n1 W- u2 L

- R: u8 l* X  x$ R一抗来源是兔和小鼠，那么你二抗分别选择抗兔和抗小鼠的就可以了吧，两个二抗分别标记不同颜色荧光。两个一抗可以同时孵育也可以分别孵育，需要摸索条件。经验是特异性结合能力弱的先孵育，再加特异性结合能力强的一抗。二抗一般不需要分开孵育。