关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

请叫我晓白

请问如果一抗是小鼠抗大鼠IgM，是否二抗必须选择抗小鼠IgM的二抗？
& W6 ?, [; s" r" R+ R; e! n7 d  E如果一抗是小鼠抗大鼠IgG1，那二抗需要选择针对IgG1的二抗还是只需要选择抗小鼠IgG就可以了?
7 c* l& E2 Y6 d% b7 I! f1 y有的一抗表明了抗体的亚型，比如IgM、或者IgG1、2等
8 W9 F( y9 m- v2 U" E1 z1 T请问这对选择二抗有什么影响

sun_happone

我也想知道，求高手~~~

xiangyu83

% H# ]% c9 ]: }2 x; i
第一个问题： 是的。二抗必须指向一抗同型。  Z: v+ B3 t4 @- H# z: O; ?
第二个问题：一般实验不必区分亚型。IgG类的二抗是通用二抗，可以和各个不同亚型IgG结合。
# _1 v( f8 p: l2 N以下是一些常识（copy）:
6 k4 p1 t& }/ q1 }二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体.$ _- ^, a: D1 C  z  [1 M6 e
单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗体。- u1 p) g' v1 s9 X/ S7 G) G
如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。
; O6 L* |3 C2 a- E; b. r如果你不知道一抗是哪一类别或亚类，那么抗小鼠IgG是一个不错的选择，因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子
& ?! E! M, M, U1 S% E7 J- `8 y) ~% [1 E) M7 r3 F  t# l
多谢指导。请问一般来说IgG和IgM哪种抗体效果好一点呢？据说IgG效果更好是吗

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

chutu

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回复 请叫我晓白 的帖子: f# w/ m4 a! O- p" s! M9 @
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好像楼主开始就把一抗、二抗搞反了。一抗是against某个特定抗原的，一般是单抗，单抗才有分型的说法，多抗里什么类型都有。单抗多数是小鼠来源的，也有大鼠和兔源的。二抗是against一抗免疫球蛋白上的抗原决定簇的，各抗体亚类包含不同的抗原决定簇，所以如果二抗选择单抗，就必须是抗一抗的那种亚类的。但是二抗一般用多克隆抗体血清，因为可以通用，不用管一抗所属的亚类，只要知道哪种动物来源的那类抗体，IgG还是IgM，多克隆抗体血清都有效，可以把其上偶联的荧光分子或显色酶等结合上去

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子
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4 ?1 E8 e8 W# C4 D我目前做荧光双标，必须要小鼠来源的一抗，但搜来搜去就只发现这一种，但是是IgG。不知道染色效果怎么样啊

xiangyu83

回复 请叫我晓白 的帖子1 r& l# o3 U. F, A* G

* E2 Q; U4 ]& ~( n+ o: _, R不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

请叫我晓白

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大鼠组织。因为我做双标已经买了一种兔来源的一抗了，另外一种只有小鼠的了啊" B/ Q4 Z5 k) o/ _
其他来源的貌似很少啊。有什么办法克服吗？

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。