关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

请叫我晓白

请问如果一抗是小鼠抗大鼠IgM，是否二抗必须选择抗小鼠IgM的二抗？# g4 }7 m6 U4 q; T% M
如果一抗是小鼠抗大鼠IgG1，那二抗需要选择针对IgG1的二抗还是只需要选择抗小鼠IgG就可以了?3 l+ x+ M. I3 L, Z7 W' O
有的一抗表明了抗体的亚型，比如IgM、或者IgG1、2等7 X; F# Q4 B, Q8 I, @( g& v% w
请问这对选择二抗有什么影响

sun_happone

我也想知道，求高手~~~

xiangyu83

( Z: ?' d- J3 Z1 e+ ^) {& F" D4 }. K第一个问题： 是的。二抗必须指向一抗同型。  N1 l- A) E, f& Z8 V; ]+ r. q6 Q
第二个问题：一般实验不必区分亚型。IgG类的二抗是通用二抗，可以和各个不同亚型IgG结合。
8 c5 P1 _; l( P/ l以下是一些常识（copy）:1 g' `) Y0 ~1 ^+ K9 r
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体.% N+ `) ]" |' |/ {9 W- A4 e/ ^
单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗体。
. m) a" r' ^6 E* f5 e如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。
7 p* s% j% u; R0 h! m' P如果你不知道一抗是哪一类别或亚类，那么抗小鼠IgG是一个不错的选择，因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子# v. p% q. |3 ^

  [3 J' I# x6 }多谢指导。请问一般来说IgG和IgM哪种抗体效果好一点呢？据说IgG效果更好是吗

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

chutu

! x+ q2 D, i5 U+ y/ l

3 V) P5 _) z7 E6 z! x回复 请叫我晓白 的帖子
' }) t! E& c; Y2 O' X2 g9 N" b+ F! `* }. `2 \  z  ~
好像楼主开始就把一抗、二抗搞反了。一抗是against某个特定抗原的，一般是单抗，单抗才有分型的说法，多抗里什么类型都有。单抗多数是小鼠来源的，也有大鼠和兔源的。二抗是against一抗免疫球蛋白上的抗原决定簇的，各抗体亚类包含不同的抗原决定簇，所以如果二抗选择单抗，就必须是抗一抗的那种亚类的。但是二抗一般用多克隆抗体血清，因为可以通用，不用管一抗所属的亚类，只要知道哪种动物来源的那类抗体，IgG还是IgM，多克隆抗体血清都有效，可以把其上偶联的荧光分子或显色酶等结合上去

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子
3 @0 s( h( w3 o2 w0 ~8 S
" ]% m- n" I! q/ K我目前做荧光双标，必须要小鼠来源的一抗，但搜来搜去就只发现这一种，但是是IgG。不知道染色效果怎么样啊

xiangyu83

回复 请叫我晓白 的帖子' n2 |' a' |3 h' D8 e

8 e6 G; w, m9 L9 X5 F7 W2 F3 Y- P不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子+ e  N( T5 s- |0 P- O1 g/ y

! f5 Q2 }! u4 C大鼠组织。因为我做双标已经买了一种兔来源的一抗了，另外一种只有小鼠的了啊0 c) n% y9 @- G
其他来源的貌似很少啊。有什么办法克服吗？

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。