关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

请叫我晓白

请问如果一抗是小鼠抗大鼠IgM，是否二抗必须选择抗小鼠IgM的二抗？
1 S' W& q; i9 Q/ ~& C$ S如果一抗是小鼠抗大鼠IgG1，那二抗需要选择针对IgG1的二抗还是只需要选择抗小鼠IgG就可以了?) a: P# c7 s, O8 s2 V( d
有的一抗表明了抗体的亚型，比如IgM、或者IgG1、2等! y/ k! S$ M0 P
请问这对选择二抗有什么影响

xiangyu83

回复 请叫我晓白 的帖子) r: l- o( d: q$ R
7 M/ ?% x+ I( V# V% V, m/ d
一抗来源是兔和小鼠，那么你二抗分别选择抗兔和抗小鼠的就可以了吧，两个二抗分别标记不同颜色荧光。两个一抗可以同时孵育也可以分别孵育，需要摸索条件。经验是特异性结合能力弱的先孵育，再加特异性结合能力强的一抗。二抗一般不需要分开孵育。

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子
: R1 J( |1 F. t+ S6 _# |* f* A1 f& x0 j
大鼠组织。因为我做双标已经买了一种兔来源的一抗了，另外一种只有小鼠的了啊
  j1 T* ]3 k% m  [. S其他来源的貌似很少啊。有什么办法克服吗？

xiangyu83

回复 请叫我晓白 的帖子0 C6 Y4 p) ]" [1 N7 S, M1 N

/ f& N5 `: s8 O不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子
) j; g+ ~+ s& B9 Y% Y. d5 b: p/ U
我目前做荧光双标，必须要小鼠来源的一抗，但搜来搜去就只发现这一种，但是是IgG。不知道染色效果怎么样啊

chutu

' _. K+ h; l. j" C/ u. O- t  u. T# ?9 K+ e7 l' m
回复 请叫我晓白 的帖子# W8 M( P* b; h

8 K! G# b% R3 X6 `+ l好像楼主开始就把一抗、二抗搞反了。一抗是against某个特定抗原的，一般是单抗，单抗才有分型的说法，多抗里什么类型都有。单抗多数是小鼠来源的，也有大鼠和兔源的。二抗是against一抗免疫球蛋白上的抗原决定簇的，各抗体亚类包含不同的抗原决定簇，所以如果二抗选择单抗，就必须是抗一抗的那种亚类的。但是二抗一般用多克隆抗体血清，因为可以通用，不用管一抗所属的亚类，只要知道哪种动物来源的那类抗体，IgG还是IgM，多克隆抗体血清都有效，可以把其上偶联的荧光分子或显色酶等结合上去

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子
  R2 P: m% x$ J' ]; A
+ @0 }, B7 C0 m& N3 V/ j4 {7 @多谢指导。请问一般来说IgG和IgM哪种抗体效果好一点呢？据说IgG效果更好是吗