神经干细胞培养包被物的选择

Life_Tech

回复 changbo529 的帖子7 M$ M1 j. }" c9 u* f' U

/ D2 w, q; B- [我们推荐纤连蛋白或CELLstart™ CTS™配制基质，可参考该链接中的实验方案lifetechnologies.com/neuroprotocol/hnsc2 ~# c3 @& _3 E
完整的实验方案已汉化，稍后分享给大家$ A: W8 H; Z7 ~' j  f% P
3 t, j/ F) r. e; z8 H- q8 F
采用CELLstart™ CTS™包被培养器皿' g; T+ ^! B0 ^5 B! V. s
1. 用含有钙和镁的D-PBS以1:100稀释CELLstart™ CTS™ (如，50 μL的CELLstart™/ }+ m6 c9 Z* a6 u$ ~4 S& p/ K
CTS™稀释至5 mL的D-PBS中) 。/ i' s- X. c+ G  Z9 W+ U
注：CELLstart™ CTS™ 不得冷冻、涡旋振荡或剧烈搅拌，否则可能形成凝胶。- I# W! a9 D* b% j. R; [! R+ a: E6 {
2. 用CELLstart™ CTS™工作液包被培养器皿的表面 (T-75：14 mL，T-25：7 mL，60-mm0 a9 `1 n, S7 ]% |8 \
培养皿：3.5 mL，35-mm培养皿：2 mL) 。
! T( d) N) x" W! R3 O+ T1 k5 ]. f3. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中孵育1小时。
" z5 L9 h. V8 y9 [4. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除所有CELLstart™ CTS™溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。
* x" ?/ A0 k$ M' d2 v% x0 P注：您可以提前包被培养板，置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2周。直至使用前，切勿去除CELLstart™ CTS™溶液。确保培养板不变干。8 w( b& t4 {/ {* G+ T) p; g/ P
9 A4 I$ P/ N' @0 {- [
采用纤连蛋白包被培养器皿6 s: [/ G9 ^" e4 b+ Z' t# Z8 i3 v( s8 T4 Y
1. 用蒸馏水稀释纤连蛋白，配制成1mg/mL的储存溶液。
0 a* _# w4 Y' p2. 将工作液置于-20°C下保存待用。
/ M: `7 c5 A( p5 y- {3. 将储存溶液加入D-PBS中，配制20 μg/mL的工作液。
4 a) s" ^; x4 d$ T4. 加入足量的工作液，覆盖培养器皿的表面 (T-75: 10 mL，60-mm培养皿: 2.5 mL，35-
7 w; ]' P+ u6 d0 x6 z) U% jmm培养皿: 1.5 mL) 。% N& S: w/ _3 Z- R) x$ K& V( Q
5. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中培养1小时。
. N; i1 q5 O. H8 O1 i6. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除纤连蛋白溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。' k! Y8 n6 ]! ~
注：您可以将纤连蛋白处理的培养板置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2 周。确保培养板不变干。无需清洗步骤，吸取多余液体后可直接使用培养皿。

Life_Tech

回复 changbo529 的帖子
  ]1 b6 |+ R0 C/ ~+ i8 W, D% c0 }/ M, b! f1 ^
我们现在可以提供中文版神经生物学研究的17个实验方案了，欢迎来申领哦。见以下链接中的帖子。
+ _# ~: J2 u5 L# B: z0 v3 l! T: Z% k. v0 C" c# q
http://www.stemcell8.cn/thread-72983-1-1.html